Что может спровоцировать отрыв тромба: Названы основные причины отрыва тромба — Российская газета
Вакцины и тромбоз: есть ли связь, кто в группе риска, как уберечься | Громадское телевидение
1
Может ли вакцина от AstraZeneca вызвать тромбоз?
Подозрения есть, но этот вопрос еще исследуют.
На начало апреля было известно о 222 случаях тромбозов на 34 миллиона прививок AstraZeneca в Великобритании и 30 других странах (ЕС, Исландия, Норвегия и Лихтенштейн).
Из них, согласно анализу Европейского агентства лекарственных средств (European Medicines Agency, EMA), 169 случаев — это тромбоз синусов твердой мозговой оболочки, 53 — тромбоз глубоких вен.
В марте некоторые страны из-за сообщения о возможных побочных эффектах приостанавливали прививки вакциной AstraZeneca. А Дания собирается полностью отказаться от этой вакцины.
Но, например, Австрия отказалась только от некоторых партий вакцины, а Бельгия, Польша и Чехия сообщили, что продолжат вакцинацию препаратом от AstraZeneca.
Впоследствии европейские страны возобновили вакцинацию этим препаратом, но с ограничениями для определенных возрастных групп.
Британское Агентство по регулированию лекарственных средств и медицинских товаров отмечает, что доказательства связи между вакцинацией и тромбозами уже более убедительны, однако все еще нуждаются в дополнительных исследованиях.
А Европейское агентство лекарственных средств (EMA) пришло к выводу, что необычные тромбы с низким содержанием тромбоцитов должны быть внесены в список очень редких побочных эффектов Vaxzevria (так теперь после переименования называется вакцина от AstraZeneca). Впрочем, агентство продолжает изучать данные о вакцинации.
В Украине известно о двух смертях, которые наступили через некоторое время после вакцинации препаратом CoviShield (под этим названием вакцину от AstraZeneca выпускают в Индии, где Украина ее и приобрела). Однако ни один из этих случаев не связывают с прививкой.
2
А другие вакцины тоже под подозрением?
«Надо понимать: если сначала тромбозы наблюдали после вакцинации AstraZeneca, то это не значит, что эта вакцина плохая. Когда начали анализировать другие, то были случаи и после вакцин Johnson & Johnson, Pfizer. Похоже, это общая проблема вакцин от коронавируса», — говорит биофизик Семен Есилевский.
По его словам, это может быть связано с тем, как реагирует иммунная система на повышение содержания S-белка.
«Те вакцины, которые сейчас есть от ковида, включают в себя этот S-белок. Теоретически, у любой из них может быть такой риск тромбозов. Однако, например, по CoronaVac у нас мало исследований, и таких сообщений пока не было», — говорит Семен Есилевский.
Вакцина Johnson & Johnson также столкнулась с проблемой редких тромбозов. Из почти 7 миллионов человек, которых прививали этой вакциной в США, тромбоз обнаружили у 6 человек.
Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) посоветовало пока приостановить использование этой вакцины. А американская биофармацевтическая компания Emergent BioSolutions прекратила новое производство вакцины на своем заводе в Балтиморе, пока FDA не завершит инспекцию.
А в , авторами которого являются ученые из Оксфорда, речь идет об анализе возможного влияния вакцинации еще на один тип тромбоза — тромбоз воротных вен.
Согласно исследованию, вероятность его возникновения через некоторое время после прививки вакциной от Pfizer — 44,9 на миллион, а после AstraZeneca — 1,6 на миллион. То есть, согласно этому исследованию, риск возникновения этого вида тромбоза после прививки препаратом от Pfizer в 30 выше по сравнению с AstraZeneca.
Впрочем, как считает глава бюро ВОЗ в Украине Ярно Хабихт, это нормальная ситуация, когда во время больших кампаний вакцинации появляются сигналы о болезнях, которые могут возникать после иммунизации.
«Это не всегда означает, что события связаны с самой вакцинацией, но их нужно исследовать. Также это свидетельствует, что система надзора работает и действует эффективный контроль», — говорит Ярно Хабихт в комментарии hromadske.
3
А коронавирус тоже повышает риск тромбозов?
«Даже если установят, что эти случаи тромбозов вызваны вакциной, то риск таких тромбозов при коронавирусе в десятки раз выше», — говорит Семен Есилевский.
Инфекционист Федор Лапий отмечает, что рост количества тромбозов начали фиксировать еще до начала вакцинации в мире, поскольку сам коронавирус увеличивает риски возникновения тромбов, даже если протекает бессимптомно.
«Нельзя исключать, что те тромбозы, которые выявляли в течение двух недель после вакцинации, могут быть связаны с коронавируом и просто совпали по времени с проведением вакцинации», — объясняет инфекционист.
Согласно исследованиям ученых из Оксфорда, в Великобритании среднее количество случаев тромбоза сосудов головного мозга, которые наблюдались через некоторое время после вакцинации AstraZeneca — 5 на миллион. После Pfizer — 4 на миллион. А в результате COVID-19 — 39 случаев на миллион.
А риск возникновения тромбоза воротных вен в результате COVID-19 — 436 на миллион.
4
Почему тогда столько вопросов именно к AstraZeneca?
Семен Есилевский делает предположение, что это связано с большим спросом на вакцины и конкуренцией.
«Если у конкурента обнаруживают какие-то проблемы или побочные реакции, то это раздувают. Сначала критика шла в сторону AstraZeneca. И можно понять, почему, ведь она дешевле, чем Pfizer. А конкуренция у Pfizer велика, особенно на рынках менее богатых стран», — говорит он.
«Сейчас в Оксфорде решили им ответить, и исследовать побочные эффекты Pfizer, о которых говорят мало, но они есть. Начинается своего рода война между производителями», — говорит ученый.
Johnson & Johnson обращались к другим производителям вакцин с предложением объединить усилия для изучения рисков образования тромбов, однако компании Pfizer и Moderna отказались, согласилась только AstraZeneca.
«Это еще один пример такой войны между производителями, потому что у Pfizer все настолько хорошо, что им это не надо. Они настолько завалены заказами, что им не нужно показывать проблемы, которые у них, безусловно, есть, как и у всех», — говорит Семен Есилевский.
5
Кто в группе риска?
Пока нет конкретных подтверждений, кто может попасть в группу риска. Однако большинство выявленных случаев тромбоза были у женщин в возрасте до 60 лет, и возникали они в течение 2 недель после вакцинации.
В нескольких странах, в частности в Германии и Нидерландах, ограничили прививки вакциной от AstraZeneca для людей младше 60 лет. А во Франции — до 55 лет.
Кроме того, после вакцинации препаратом от Johnson & Johnson тромбозы обнаружили тоже у шести женщин в возрасте от 18 до 48 лет.
«Это единичные случаи, поэтому статистика зависит и от групп, которые вакцинируют в этот период. Например, если начали вакцинировать школьных учителей, то среди них женщин больше. Чтобы посчитать правильно статистику, надо знать, какие конкретно возрастные группы вакцинировали в конкретной стране. Такие данные не всегда можно получить, поэтому пока есть лишь предположения», — говорит Есилевский.
В ЕМА отмечают, что пока нет достаточной информации о конкретных факторах риска. И подчеркивают, что польза от прививки все равно превышает возможные риски тромбозов.
Поддерживает позицию европейского регулятора и Министерство здравоохранения Украины.
«Любые риски от прививок нивелируются рисками от самой болезни. Если мы посмотрим на количество неблагоприятных событий после проведения прививок, то это 0,23% от общего количества прививок», — говорит нам главный санитарный врач Украины Виктор Ляшко.
6
Как избежать тромбоза?
«Тромбоз можно предупредить, вакцинировавшись от ковида, ведь при заболевании риск получить его значительно выше. Риск тромбозов возрастает у курильщиков, но почему-то сигареты не запрещают. Также тромбы могут возникать из-за оральных контрацептивов, но от них тоже не отказываются. То, что пугает людей, и то, что их убивает — разные вещи», — говорит Федор Лапий.
Тромбозы возникают крайне редко, говорит Есилевский, поэтому непонятно, что именно их провоцирует, и конкретных советов о том, как их избежать, пока никто дать не может.
«Сейчас можно только следить за тем, чтобы не было угрожающих симптомов, и в случае их появления обращаться к врачу. Потому что тромбоз — это не приговор, он лечится, если его вовремя выявить», — объясняет ученый.
7
Каковы симптомы тромбоза?
Пациенты должны немедленно обратиться за медицинской помощью, если после прививки появились следующие симптомы:
- одышка
- боль в груди
- отеки ног
- постоянная боль в животе
- сильные и постоянные головные боли или затуманивание зрения
- крошечные пятна крови под кожей у места инъекции
Глава бюро ВОЗ в Украине говорит, что медики должны настороженно относиться к таким симптомам, которые могут проявиться в период от 4 до 20 дней после прививки.
УЗИ сосудов нижних конечностей в клинике Сахбиевых Набережные Челны
Ранняя диагностика – залог вашего здоровья
Ультразвуковое исследование (УЗИ): в основе данного диагностического метода лежит пьезоэлектрический эффект кристаллов, генерирующих колебания (ультразвуковые волны, сигналы) под воздействием на них переменного тока. Отраженные сигналы от тканей обрабатывает компьютерная программа, создавая изображение на мониторе аппарата, врач видит возможные нарушения и изменения в тканях пациента . Ранняя ультразвуковая диагностика позволяет на ранних сроках выставить правильный диагноз, что обеспечит своевременное лечение множества заболеваний.
Подготовка к УЗИ
Специальная подготовка не нужна. Приветствуются обычные гигиенические процедуры в виде купания, необходимо одевать свежее нижнее белье. Специальной диеты или режима питания перед диагностикой соблюдать не нужно.
Ультразвуковая диагностика сосудов нижних конечностей подразделяется на диагностику артерий (артериальный приток) и диагностику вен (венозный отток).
Ультразвуковая диагностика артерий нижних конечностей
Ультразвуковая диагностика артерий нижних конечностей проводится для исключения или подтверждения таких заболеваний как: атеросклероз, эндартериит, диабетическая макроангиопатия, аневризмы артерий, травмы и повреждения артерий.
Обследование позволяет полностью просмотреть все кровеносные артерии от паха до пальцев стопы, определить диаметры артерий, скорость артериального кровотока, состояние артериальной стенки.
При атеросклерозе в просвете артерий очень четко визуализируются атеросклеротические бляшки – атеромы, которые частично или даже полностью могут закрывать просвет приносящего кровь сосуда.
При эндартериите, как и при диабетической макроангиопатии происходит утолщение внутреннего слоя артериальной стенки, тем самым уменьшается просвет артерии, и как следствие происходит нарушение кровоснабжения нижней конечности.
Крайними проявлениями артериальной патологии является ишемия (нехватка крови) и как следствие гангрена пальцев или стопы.
Поэтому большое значение и уделяется, во-первых своевременному выявлению начальных проявлений заболеваний артерий, во-вторых оценке уже явных патологических изменений для решения вопроса о консервативном или хирургическом лечении.
Курильщики со стажем находятся зоне стопроцентного риска по атеросклерозу артерий нижних конечностей, преклонный возраст также является отягощающим фактором. Первые жалобы больных атеросклерозом на зябкость стоп, последующие жалобы на боли в икрах при ходьбе – так называемая перемежающаяся хромота. |
Ультразвуковая диагностика вен нижних конечностей
Ультразвуковая диагностика вен нижних конечностей включает в себя исследование поверхностных (большая и малая подкожные вены) и глубоких вен бедра и голени.
Цель данного обследования заключается в выявлении таких заболеваний как: варикозное расширение поверхностных вен, перенесенный или острый флеботромбоз (тромбофлебит).
Варикозная болезнь может затрагивать как большую подкожную вену, так и малую. По результатам квалифицированного обследования, врачом сосудистым хирургом выносится решение о тактике лечения: сосудистый хирург на основании информации о состоянии поверхностных вен может предложить пациенту консервативную терапию, либо хирургическое лечение: классическую кроссэктомию, лазерную облитерацию или радиочастотную облитерацию патологически расширенной вены.
Данное обследование позволяет определить наличие смертельно опасных тромбов в системе глубоких и поверхностных вен – речь идет об остром флеботромбозе. К сожалению пациент при появлении болей в ноге не всегда обращается к специалистам, а зачастую сам ждет когда «пройдет».
При остром флеботромбозе в одной или в нескольких венах образуются тромбы, причем причины возникновения тромбов могут быть разнообразны. В первые дни остроготромбоза тромбы не всегда бывают хорошо прикреплены к стенкам вены и при ходьбе сжимающие вены мышцы могут спровоцировать отрыв тромба и он по потоку крови пойдет по венам в направлении к сердцу.
Комплексное обследование в «Клинике Сахбиевых»: преимущества и отличия
Новейшее оборудование премиум уровня Обследование проводится на ультразвуковом суперсовременном аппарате премиум уровня (наивысший класс) RS80A. Не секрет, что именно от уровня аппарата и от его возможностей зависит результат обследования, аппарат является глазами специалиста, чем лучше аппаратура, тем легче специалисту разобраться с поставленной задачей и выставить правильное заключение по проведенному обследованию.
|
|
Специалисты с большим опытом и стажем
|
|
Нам доверяют профильные специалисты высокого уровня ведущих медицинских клиник По результатам обследования профильные врачи нашей клиники и других уважаемых лечебных заведений, случае наличия патологии назначают квалифицированное лечение. |
Опасны ли тромбы в венах? –
Некоторые люди, которые стали заложниками крайне неприятного заболевания – варикозного расширения вен, считают, что в их сосудах где-то обязательно должны находиться тромбы, которые несут серьезную угрозу здоровью. Чаще всего такие опасения имеют под собой реальную основу, тем более, если подобные случаи уже происходили у родственников или знакомых. Иногда боязнь смертельного исхода становится просто навязчивой идеей. Так что же такое тромбы в венах и присутствуют ли они у всех больных варикозом? Давайте разбираться.
Заболевание носит название тромбоз вен, или тромбофлебит. Само по себе воспаление (или флебит) иногда возникает и без наличия тромба. Этот недуг действительно несет серьезную угрозу здоровью и жизни человека, даже тогда, когда острый период болезни проходит.
Тромбофлебит развивается как в глубоких, так и в поверхностных венах. Эти заболевания различаются как по симптомам, так и по способам лечения.
Тромбофлебит поверхностных вен опасен тем, что воспаление может распространиться на глубокие вены в ходе острого периода болезни. Когда острые проявления болезни стихают, разрушение клапанного аппарата воспаленных вен может серьезно сказаться на их функциональных способностях.
Более серьезным заболеванием является тромбоз глубоких вен. Если происходит закупорка венозной магистрали, венозный отток резко снижается. Если вены поражены в районе бедер, возникает высокая опасность отрыва тромба. В этой области кровоток более быстрый, он мешает тромбу прирастать к венозной стенке и может спровоцировать его к миграции в сторону сердца. В сердце тромб не останавливается, а продолжает перемещение к легочной артерии. Сосуды здесь имеют меньший диаметр, поэтому, чем больше тромб, тем быстрее он застрянет и тем опаснее возможный исход для больного.
При таких ситуациях у больного начинают появляться боли в области сердца, в груди, одышка, сердцебиение, чувство страха, беспокойство. Эти состояния развиваются внезапно. Часто закупорка тромбом легочной артерии становится причиной смерти больного. В данной ситуации требуется очень сложное и дорогостоящее лечение.
Течение тромбофлебитов может быть и не таким серьезным. Часто при адекватной терапии болезнь заканчивается благополучно. Опасности отрыва тромба уже нет, отек сходит, но требуется лечение в стационаре, иногда до 2-3 недель. В самых сложных ситуациях курс лечения (постоянная эластическая компрессия поражённой нижней конечности, приём специальных лекарственных препаратов-антикоагулянтов) может продолжаться от нескольких месяцев до 1 года. Тяжесть болезни зависит от того, в какой вене разместился тромб и какие процессы с ним происходят.
Если лечение тромбофлебита не начать вовремя, может развиться венозная язва, а в дальнейшем – хроническая венозная недостаточность. Вам обязательно потребуется помощь флеболога, если отечность не спадает, если кожные покровы начали приобретать синюшный цвет, присоединились боли, тяжесть, усталость.
Ни в коем случае нельзя доводить организм до подобных состояний. Флебология (современная наука о венах) имеет десятки способов и эффективных средств лечения различных заболеваний. При возникновении тромбофлебитов назначаются лекарственные препараты для восстановления кровообращения, которые разжижают кровь, улучшают микрососудистую циркуляцию, ликвидируют воспалительные явления и повышают венозный тонус. При перенесенном заболевании нужно обеспечить все условия для предотвращения повторного развития тромбоза.
Врач-флеболог даст необходимые консультации не только по лечению, но и образу жизни и поддерживающей терапии для ваших вен. К сожалению, в случаях несвоевременного обращения к специалисту после перенесенного тромбоза глубоких вен около 30-40 процентов больных вынуждены оформлять инвалидность. Это очень печальная статистика, которая свидетельствует о том, что, чем раньше вы начнете борьбу с болезнью, тем с меньшими потерями сможете выйти из этой схватки. Но лучше не допускать подобных состояний вообще, вести активный образ жизни, выполнять рекомендации флебологов, внимательно следить даже за малейшими симптомами начинающейся болезни и вовремя идти на прием к врачу.
Спорт при варикозе на ногах: каким можно заниматься
Многие пациенты с диагнозом «варикозное расширение вен» полностью отказываются от физических нагрузок, боясь усугубить ситуацию. Однако врачи флебологи считают такой подход неверным.
Активный образ жизни и правильное питание – важная часть лечения варикоза. Умеренные нагрузки положительно влияют на состояние пациентов:
- повышают скорость кровотока;
- устраняют венозный застой;
- укрепляют мышцы нижних конечностей;
- снимают боль и отеки;
- способствуют снижению веса;
- улучшают настроение.
Чтобы занятия спортом при варикозной болезни приносили пользу, нужно предварительно проконсультироваться с врачом. Доктор поможет подобрать вид и интенсивность физической нагрузки с учетом индивидуальных особенностей течения болезни у пациента.
Спорт на разных стадиях варикоза
Выбирая вид спорта и уровень физической нагрузки, нужно учитывать пол, возраст, хронические заболевания, а также состояние пациента. Однако самый важный критерий выбора – стадия варикозного расширения вен. Чем тяжелее протекает болезнь, тем внимательнее должно быть отношение к подбору упражнений.
Стадия I.
Стадия II. На этой стадии наблюдаются более заметные проявления. Присоединяются ретикулярно-расширенные вены до 3 мм, чувство усталости и ощущения огня. Облегчить состояние пациента поможет аквааэробика, плавание, йога, стретчинг, спортивная ходьба и бег трусцой.
Стадия III. В этой стадии происходят гемодинамически значимые проявления варикозной болезни. Нарастает венозный застой, за счет этого образуется отек нижней конечности, усиливается тяжесть, усталость, присоединяются судороги в ночное время (синдром беспокойных ног). На этой стадии допустимы только легкие нагрузки по согласованию с врачом. Флебологи рекомендуют заниматься плаванием и аквааэробикой, совершать короткие прогулки, делать зарядку. С этой стадии обязательно требуется подбор компрессионного трикотажа.
При правильном выборе вида спорта пациент ощущает облегчение за счет снижения интенсивности боли и отечности. Если состояние больного ухудшается, любые упражнения необходимо прекратить и немедленно обратиться к врачу. Читайте подробнее о лечении варикоза в нашей клинике.
Рекомендации и правила занятий спортом при варикозе
Чтобы спортивные нагрузки приносили пользу больному, следует придерживаться таких правил техники безопасности:
- Для снижения нагрузки на расширенные вены ног перед тренировкой нужно надеть специальное компрессионное белье (гольфы, чулки, колготки) или использовать эластичный бинт. Чтобы добиться оптимальной степени компрессии, важно правильно выбрать размер компрессионного белья.
- Во время тренировки рекомендуется пить много воды. Это необходимо, чтобы предотвратить обезвоживание, вызывающее повышение вязкости крови. Изменение реологических свойств крови может привести к образованию тромбов и спровоцировать опасные для жизни состояния.
- Тренируясь, желательно избегать длительных статических нагрузок и не поднимать тяжести. Силовые упражнения на нижние конечности допустимы на ранних стадиях варикоза, но выполнять их следует сидя или лежа.
- После тренировки врачи рекомендуют лечь на спину и приподнять ноги вверх. В таком положении нужно лежать 5-10 минут, чтобы стимулировать отток крови из вен. Это снижает нагрузку на сосуды нижних конечностей. Такое упражнение рекомендовано также после тяжелого трудового дня.
Выполняя спортивные упражнения, важно прислушиваться к реакции организма. Боль, дискомфорт, судороги, общая слабость – веские причины прекратить тренировку.
Упражнения можно выполнять в домашних условиях, самостоятельно в спортзале или с тренером. Последний вариант снижает риски для человека, больного варикозной болезнью.
Рекомендуемые виды физической нагрузки
При патологиях вен предпочтение следует отдавать видам спорта, не создающим высокой нагрузки на сосуды. Полностью безопасны для больных варикозом такие виды спорта:
Плавание и динамичные упражнения в воде (аквааэробика) – вода оказывает мягкое компрессионное воздействие, увеличивая циркуляцию крови и устраняя венозный застой.
Спортивная ходьба – ежедневные прогулки в умеренном темпе положительно влияют на сердечно-сосудистую систему. Оптимальная продолжительность ходьбы составляет 30-40 минут. Врачи и тренеры рекомендуют практиковать скандинавскую ходьбу с палками.
Велоспорт. Велосипедные прогулки по относительно ровной местности укрепляют сосудистые стенки. Езда на велосипеде допустима только в специальном компрессионном белье.
Легкий бег трусцой — бег со скоростью 7-8 километров в час стимулирует кровообращение, повышает тонус сосудов, улучшает общее состояние человека.
Специальная гимнастика – существует комплекс упражнений, разработанный и одобренный врачами флебологами. Ознакомиться с ним можно на приеме доктора.
Гольф – игра связана с постоянным передвижением по полю, что способствует эффекту спортивной ходьбы.
Существует также перечень видов спорта, которые допустимы только после консультации с врачом флебологом:
- танцы;
- занятия на тренажерах;
- фитнес;
- стретчинг;
- лыжный спорт;
- йога.
Возможно сочетание физических нагрузок и дыхательных практик.
Запрещенные виды спорта при варикозе
Пациентам с варикозным расширением вен категорически запрещены следующие спортивные дисциплины:
- степ-аэробика;
- командные виды – футбол, баскетбол, хоккей;
- большой теннис;
- тяжелая атлетика;
- бодибилдинг;
- единоборства;
- интенсивный бег;
- прыжки на скакалке;
- прыжки в длину и высоту;
- катание на сноуборде;
- мотоспорт;
- конные прогулки.
Противопоказан также любой экстрим, включая дайвинг, прыжки с парашютом, серфинг, бейсджампинг.
Абсолютные противопоказания
Чрезвычайно опасными для больных варикозом могут быть любые ударные виды спортивных нагрузок. Это связано с частым сочетанием расширения вен с тромбозом. Ударные нагрузки могут спровоцировать отрыв тромба. Это угрожает не только здоровью, но и жизни человека. К ударным дисциплинам относят дзюдо, джиу-джитсу, самбо, вольную борьбу и т.д.
Спорт после операции
После удаления варикозных вен занятия спортом не противопоказаны. Современные безопасные методы проведения операций позволяют вернуться к физической активности уже через 2-3 недели после процедуры. Точное время зависит от объема вмешательства и состояния здоровья пациента. При применении лазерных или радиочастотных методик период восстановления обычно не превышает 2-х недель. Однако занятия спортом после операции допустимы только после консультации с лечащим врачом.
Блог и новости
Как выявить и вылечить варикоз ног – советы флеболога
Сосудистые звездочки, вздутые вены под кожей, сетка из капилляров на ногах – все это проявления варикозного расширения вен. В природе варикоз бывает только у людей – это наша расплата за прямохождение. И больше всего от проблем с венами страдают женщины. Им в три раза чаще, чем мужчинам ставят подобный диагноз. Это происходит потому, что во время беременности повышается внутрибрюшное давление, отток крови из нижних конечностей по поверхностным венам нарушается, и они начинают расширяться. Неудивительно, что средний возраст диагноза для женщин – это 20-25 лет. Впрочем, по последним данным, сейчас заболевание помолодело и встречается даже среди подростков 12-16 лет. К сожалению, варикоз представляет смертельную угрозу для человека. Тромбофлебит, тромбоэмболия, трофические язвы и кровотечения – все это может привести к летальному исходу. Однако диагностика заболевания на ранних стадиях и профилактика позволяют исключить операцию на венах ног либо отложить ее на долгие годы. Как предупредить ухудшение и правильно выбрать методы лечения рассказал Саламат Бисеков, к.м.н., врач-флеболог, хирург медицинского амбулаторно-поликлинического центра «К Медицина», выполнивший более 15 тысяч процедур против варикозного расширения вен.
ЗВЕЗДОЧКИ И СЕТОЧКИ.
В России только официально зарегистрировано более 38 миллионов человек, страдающих различными формами варикозной болезни. Из них у 15 процентов имеются трофические расстройства. Это наша «национальная» особенность — преобладание осложненных форм заболевания. Статистика не утешительная, и уже сейчас число людей с заболеваниями вен ежегодно увеличивается на 2,5 процента. «Да, далеко не все вовремя реагируют на первые проявления заболевания, когда его еще можно предупредить, — поясняет Саламат Бисеков, врач-флеболог. – Вначале появляется тяжесть, усталость в ногах в конце дня. Это происходит вне зависимости от физической нагрузки, т.е. неважно много вы ходили или мало (вот уже на это моменте стоит обратиться к врачу). После этого начинают появляться отеки, синие и красные пятнышки на коже — сосудистые звездочки и сеточки. Так поражаются мелкие сосуды. Затем над поверхностью кожи начинают выступать извитые вены и венозные узлы, которые при прощупывании могут болеть». В группу риска попадают не только беременные женщины, но и любительницы каблуков, люди, принимающие гормональные препараты, и те, кто долго стоит или сидит на работе.
У варикоза практически всегда будут осложнения, если его не лечить. Одно из самых частых – это тромбофлебит. Воспаление внутренних стенок вен приводит к возникновению тромбов. Тромбы перекрывают просветы вен (флеботромбоз), либо, оторвавшись от стенки кровеносного сосуда, попадают в легкие (тромбоэмболия). В этом случае последует мгновенная смерть. Причем, отрыв тромба могут спровоцировать любая, даже легкая травма, перелет на самолете или долгое сидение в машине в пробке.
ПОМОЩЬ.
В зависимости от запущенности заболевания, флебологи центра «К Медицина» предлагают разные варианты лечения. «Для начала рекомендуется сдать анализ на свертываемость крови и пройти УЗИ клапанного аппарата вен на самом современном оборудовании нашей клиники, — продолжает Саламат Бисеков. – Затем часто назначается консервативная терапия – это комплексное лечение медикаментозными препаратами. Например, мы выписываем венотоники, которые улучшают венозный тонус, также рекомендуем препараты, разжижающие кровь и уменьшающие отечность. Также врачи центра подберут удобный компрессионный трикотаж. Это очень важно, чтобы его подбирал именно врач, оно должно отвечать определенным требованиям и характеристикам и быть индивидуально подобрано по размеру».
С точки зрения эстетики пациентам центра предлагают склеротерапию. Это процедура помогает избавиться от сосудистой сетки на нога». Для этого в просвет сосуда вводят специальный препарат, который вызывает склеивание его стенок и в дальнейшем — рассасывание. Если по каким-то причинам склеротерапия препаратом пациенту не показана, врач предлагает хирургическое вмешательство, которое может быть малоинвазивным. Этот вид хирургии направлен на то, чтобы минимизировать область вмешательства в организм и степень травмирования тканей. Например, один из таких малоинвазивных методов – радиочастотный. В полость вены вводится специальный катетер и продвигается вверх по вене на высоту равную предполагаемой длине участка вены, который необходимо удалить. Затем на вену начинает действовать ток, который нагревает стенки сосудов до 120 градусов. Во время нагревания вены происходят ее деструкция. В тяжелых случаях вены, которые не работают, хирурги извлекают.
После лечения в центре «К Медицина» увеличивается качество жизни пациента, уходят боли, отеки и тяжесть, а на коже не остается и следов варикоза – ноги становятся легкими, здоровыми и молодыми!
ВРЕЗ ЦИФРЫ Более 38 миллионов человек, которые официально зарегистрированы в России, страдают различными формами варикозной болезни.
ВРЕЗ Болезнь цивилизации
По данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), болезни вен включены в список «болезней цивилизации». Это заболевания, которые крайне редко встречаются в традиционных обществах, например, племенах и очень часто – в современных обществах западного типа. Это варикоз, кариес, диабет, инфаркт миокарда, артериальная гипертензия, атеросклероз, язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки и другие. Причина болезней проста – это образ жизни: высокий уровень стресса, нарушения режимов питания, сна, отдыха, гиподинамия и переедание, ухудшение экологичности среды и т.д.
Правда ли, что опасно резко вставать
Правда ли опасно для здоровья, если сразу, как проснулся, резко встать и побежать в туалет или на кухню? Читал, что так можно спровоцировать отрыв тромба, а вместе с ним инсульт или инфаркт
Кратко. У здорового человека резкое движение не может вызвать отрыв тромба и другие серьезные осложнения.
Тромбы могут образовываться и рассасываться, не влияя на здоровье. Но если человек находится в группе риска, для него тромбы опасны и без резких движений — они могут перемещаться по сосудам и блокировать движение крови к органам. Например, если мало двигаться, в ногах образуются тромбы, которые могут попасть в сердце и спровоцировать сердечный приступ.
Подробно. В крови есть естественная система свертывания. Она нужна, чтобы не было сильного кровотечения, если человек порезался. Но тромбы могут образовываться, даже если угрозы кровотечения нет — например, из-за ожирения, рака и беременности. Также тромбы появляются из-за болезней сердца: фибрилляции предсердий, сердечной недостаточности, порока сердца. Другие факторы риска — длительный постельный режим, прием комбинированных гормональных контрацептивов.
Инсульт тоже не возникает сам по себе или из-за резких движений. К факторам риска относятся:
- повышенное артериальное давление;
- сахарный диабет;
- курение;
- чрезмерное употребление алкоголя;
- недостаточная физическая активность;
- высокий уровень холестерина;
- избыточный вес или ожирение;
- нездоровое питание.
Кроме того, риск инсульта увеличивается с возрастом и если у кого-то из членов семьи уже были инсульт или сердечный приступ.
Если человек подозревает, что у него есть тромбоз, можно пройти диагностику: сдать анализ крови на D-димер — белок, который образуется, когда растворяется сгусток крови, сделать МРТ, флебографию и ультразвуковое дуплексное сканирование — когда с помощью звуковых волн определяют течение крови по сосудам.
Человеку с риском тромбоза нужно наблюдаться у флеболога. Тромбы можно лечить, например растворить антикоагулянтами или тромболитиками, установить фильтр в большую вену, чтобы сгустки не скапливались, или удалить тромб хирургическим путем. Еще флеболог назначает компрессионное белье, которое сдавливает вены и мешает образованию тромбов в сосудах.
Вот что нужно делать, чтобы снизить риск образования тромбов, развития инсульта или сердечного приступа:
- есть много фруктов и овощей;
- следить за своим весом;
- больше двигаться и заниматься спортом. Начать день можно с зарядки в постели, а потом больше двигаться в течение дня. Если есть хронические заболевания, лучше проконсультироваться с терапевтом: он расскажет, какие из упражнений можно включить в свой образ жизни;
- не курить и избегать пассивного курения;
- пить меньше алкоголя;
- надевать компрессионные чулки во время длительных перелетов, чтобы улучшить кровоток;
лечить хронические заболевания — особенно связанные с высоким артериальным давлением, высоким уровнем холестерина, диабетом и ожирением.
КАК РАСПОЗНАТЬ ИНСУЛЬТ И ЧТО ДЕЛАТЬ?
В предыдущих статьях мы уже говорили о том, что такое инсульт, как он развивается и кому чаще угрожает. А также затрагивали такой важный момент как диагностика. Чтобы свести к минимуму последствия инсульта, необходимо как можно раньше его распознать и немедленно действовать!Несмотря на расхожее в народе мнение, что инсульт — это удар судьбы, мол, если настиг ничего не поделать. На самом деле повлиять на ситуацию не только можно, но и нужно. Это тот самый случай, когда счёт идет на минуты и время бесценно.
В момент приступа мозг лишается питания, нарушается мозговое кровообращение и восстановить его надо как можно быстрее. Считается, что у врачей есть всего 3 часа на то, чтобы спасти человека. Именно в этот промежуток времени им необходимо ввести больному препараты, растворяющие тромбы и снимающие спазмы. Так можно предотвратить паралич и другие страшные последствия удара.
Как распознать инсульт?
Так как же распознать инсульт? На что обратить внимание в первую очередь? Сейчас мы расскажем главные признаки этого тяжелого недуга, которые могут спасти жизнь вашим близким.
Симптомы
Инсульт может случиться где угодно и часто происходит на глазах у других людей. Среди общеизвестных симптомов инсульта:
— внезапное онемение
— потеря равновесия
— слабость с одной стороны тела
— затруднение речи
— ослабление зрения
— внезапная головная боль
— головокружение
— эмоциональная нестабильность
— возбужденное или оглушённое состояние
Но есть и те признаки, которые встречаются реже. Их называют нетипичные симптомы, но их тоже должен знать каждый:
— приступ сильной боли в руке или ноге
— недержание мочи
— внезапная икота
— приступ сильной тошноты или боли в области живота
— внезапная усталость
— кратковременная потеря сознания
— резкая боль в груди
— приступ удушья
— внезапно участившееся сердцебиение
— светочувствительность (человек не может смотреть на яркий свет, появляются точки перед глазами)
То что все эти признаки инсульта известны, не значит что они будут развиваться одновременно. Какие-то могут проявиться сразу, какие-то позже, а что-то и вовсе можно не заметить. Все люди уникальны, и удар проявляется у всех по-разному.
Но что характерно для всех — часто при инсульте люди выглядят, как пьяные и тут важно не отмахнуться от пострадавшего.
Что делать?
Существует короткий и несложный тест, который быстро помогает понять, что у человека инсульт. Рекомендуем запомнить или записать этот алгоритм действий. Зная его, вы можете спасти жизнь человеку.
ШАГ ПЕРВЫЙ
Попросите человека выполнить несколько простых действий:
— Улыбнуться. Если лицо или улыбка выглядят асимметрично, обвисла щека или веко — это инсульт
— Поднять руки перед собой. Если одна или обе руки непроизвольно опускаются или вовсе не двигаются — это инсульт
— Назвать своё имя или повторить пару простых слов. Если речь человека спутана или невнятна — это инсульт
— Высунуть язык. Если он западает или смещен в сторону — это инсульт
Главное — действовать быстро. Ведь опасность инсультов в том, что не всегда легко определить точный тип (мы говорили о них в предыдущей статье). Один вид удара может перетекать в другой, и происходит это, порой, очень стремительно. Иногда симптомы после удара проходят, не оставляя никаких последствий. Да, такое бывает, но крайне редко, увы. Куда чаще последствия очень серьезные.
ШАГ ВТОРОЙ
Мы распознали, что человека разбил инсульт. Что дальше?
В первую очередь не впадать в панику! Вспомните известное правило — «сначала наденьте кислородную маску на себя, потом на ребенка». Это повторяют в самолетах неслучайно — вам надо быть в сознании, чтобы помочь другому. Вот и здесь также. Главное сохранять рассудок, не суетиться и не спешить. Так что в первую очередь берем себя в руки. А потом уже действуем. Но — осторожно!
Первое действие — вызов специалистов, бригады «скорой помощи». Диспетчеру по телефону обязательно скажите, что есть подозрение на инсульт, опишите симптомы, требуйте неврологическую бригаду. Они приезжают со специальным оборудованием, предназначенным именно для таких случаев. Это гарантия того, что необходимую помощь окажут еще до приезда в больницу.
Теперь, когда медики уже спешат на помощь, возвращайтесь к пострадавшему. Не забывайт — человеку перед вами куда хуже, чем вам и гораздо страшнее. Поэтому:
Успокаивайте. Говорите, что помощь в дороге, что вы рядом. Даже если человек не может произнести ни слова, есть вероятность, что он отлично понимает других. Ваши слова его успокоят, а это замедлит пульс. А чем медленнее пульс, тем меньше напряжения в мозге.
Аккуратно положите пострадавшего на бок, на твердую поверхность. Так вы поможете телу расслабиться и избежать новых приступов.
Приподнимите ноги пострадавшему. Это улучшит кровообращение, достаточно будет подложить под них свернутую одежду.
Обеспечьте достаточный доступ воздуха. Если это произошло в квартире, откройте окно, если на улице — расстегните пострадавшему одежду, ослабьте галстук, снимите обувь.
Не давайте больному ни есть, ни пить. И уж тем более никаких лекарств. Это может лишь усугубить состояние.
Если есть возможность — надо измерить давление больному. Особенно в том случае, если вы знаете, что он принимает лекарства от давления, прописанные врачом. Если давление не в норме — дайте лекарства. Повышая давление, организм пытается компенсировать недостаток кислорода в мозге. Однако именно это может спровоцировать отрыв тромба.
Не спускайте глаз с больного и ни за что не позволяйте ему двигаться. Если начнется рвота, надо подержать голову, очистить дыхательные пути.
Одним словом, ваша задача — обеспечить больному эмоциональный и физический покой до приезда медиков. Больше ничего предпринимать нельзя.
Чего делать нельзя
Ни в коем случае не вздумайте трясти, передвигать или пытаться самостоятельно транспортировать человека с приступом инсульта. Это может привести к ухудшению состояния, усилению внутреннего кровотечения и возможно — к отрыву тромбов. Исключением является лишь остановка сердца. В таком случае просто необходимо провести непрямой массаж сердца. Или искусственное дыхание.
На этом ваша помощь больному заканчивается. Дальше его судьба в руках врачей.
Страх, замораживающий кровь в ваших жилах — ScienceDaily
«Кровь замерзла в моих жилах» или «Моя кровь свернулась» — эти распространенные словосочетания можно понимать буквально, согласно последним исследованиям. Более того, в буквальном смысле, чем хотелось бы некоторым из нас. Оказывается, сильный страх и панические атаки действительно могут вызвать сгусток крови и увеличить риск тромбоза или сердечного приступа.
Более ранние исследования показали, что стресс и тревога могут влиять на коагуляцию. Однако они почти полностью основывались на анкетных опросах здоровых людей.В отличие от этого, находящаяся в Бонне исследовательская группа, состоящая из Франциски Гейзер (из клиники и поликлиники психосоматической медицины и психотерапии) и Урсулы Харбрехт (из Института экспериментальной гематологии и трансфузионной медицины), была первой, кто провел очень тщательное исследование коагуляции. у пациентов с тревожными расстройствами.
Каждый время от времени испытывает тревогу — страх провалить тест по математике, боязнь спуститься в темный подвал или, в более общем смысле, тревогу по поводу того, что нас ждет в будущем.Но некоторых людей охватывают сильные страхи, когда они сталкиваются с вполне нормальными повседневными ситуациями. Например, у людей, страдающих агорафобией, часто случаются приступы паники, когда они оказываются в толпе.
Симптомы могут быть очень серьезными: учащенное сердцебиение, потливость, дрожь, слепая паника или обморок — вплоть до смерти. Другое часто встречающееся тревожное расстройство можно охарактеризовать как социальную фобию. Те, кто страдает от страха, больше всего боятся ситуаций, в которых они становятся центром внимания в группе.Они начинают заикаться или краснеть. Чтобы не избежать смущения, люди, страдающие социофобией, могут стать отшельниками, уклоняясь от человеческих контактов и оставаясь дома.
Медицинские исследователи из Бонна сравнили пациентов, страдающих тяжелой формой панического расстройства или социальной фобии, со здоровой контрольной группой. Чтобы максимально исключить влияние таких факторов, как возраст и пол, каждый из 31 пациента с тревожными расстройствами был сопоставлен с соответствующим здоровым пациентом того же возраста и пола.Испытуемые сначала должны были сдать образцы крови, и им было предложено выполнить ряд тестов на компьютере. Затем был взят второй образец крови. Анализ крови, который измерял различные факторы свертывания, дал четкий результат: группа тревожных пациентов показала гораздо более высокоактивную систему свертывания, чем здоровая контрольная группа.
В системе коагуляции действуют два механизма, которые необходимы для жизни и обычно работают в противоположных направлениях, уравновешивая друг друга.С одной стороны, коагуляция включает сгущение крови, в результате чего может образоваться пробка, что предотвращает чрезмерное кровотечение из поврежденных сосудов. С другой стороны, существует «фибринолиз», процесс, который удерживает жидкость в крови и разрушает сгустки. Однако в случае пациентов с тревожным расстройством при тщательном анализе крови исследователи наблюдали активацию коагуляции, сопровождающуюся ингибированием фибринолиза. Тем не менее, кроме укола для забора крови, реальных травм не произошло.У этих типов пациентов система свертывания крови выходит из равновесия по мере возрастания тенденции коагуляции — возможно, с опасными последствиями. В крайних случаях дисбаланс может привести к закупорке коронарной артерии.
По словам Франциски Гейзер, тенденция к повышенной коагуляции может быть «недостающим звеном», которое объясняет, почему у тревожных пациентов статистически более высокий риск смерти от сердечных заболеваний в 3 или 4 раза. «Конечно, это не означает, что Теперь каждый пациент с выраженным тревожным расстройством должен беспокоиться о сердечном приступе.Измеренные нами значения коагуляции всегда находились в пределах физиологической шкалы, что означает отсутствие серьезной опасности », — добавляет руководитель проекта. Реальная угроза здоровью возникает только тогда, когда в уравнение также входят другие факторы риска, такие как курение и ожирение.
Франциска Гейзер также имеет хорошие новости для людей с тревожными расстройствами. Последующее исследование предоставило первые доказательства того, что активация свертывания крови ослабевает у пациентов, которые успешно завершили терапию своего состояния.В связи с этим д-р Гейзер призывает к более ранней диагностике тревожных расстройств, указывая на то, что перед назначением эффективной психотерапии тратится слишком много времени. «В конце концов, у нас есть программы, которые помогают людям бросить курить или больше заниматься физическими упражнениями. Но если мы хотим уменьшить количество сердечных заболеваний, было бы разумно улучшить методы диагностики и лечения тревожных расстройств».
История Источник:
Материалы предоставлены Боннским университетом . Примечание. Содержимое можно редактировать по стилю и длине.
Вы рискуете получить сгусток крови?
Венозная тромбоэмболия (ВТЭ) — это состояние, используемое для описания двух связанных состояний, которые включают образование тромбов, чаще всего называемых тромбозом глубоких вен (ТГВ) и тромбоэмболией легочной артерии (ТЭЛА). Это достаточно легко понять, правда? Давайте разберем слова. «Венозный» означает «в венах», а «тромб» — слово, обозначающее неподвижный «сгусток крови». «Эмбол» — это аномальная частица, такая как сгусток или воздушный пузырь, которая перемещается по телу через кровоток.Когда эмбол блокирует кровоток в кровеносном сосуде, это называется «эмболией».
Проще говоря, ТГВ — это когда сгусток крови образуется в глубокой вене, обычно в бедре или голени, а ТЭЛА — это когда часть сгустка отрывается в венах и попадает в легкие. Важно понимать эти состояния, потому что ТГВ / ПЭ может быть серьезным опасным для жизни состоянием, которое может случиться с каждым.
Что такого важного в тромбах?
Когда сгустки крови, образующиеся в ноге или бедре, расшатываются и попадают в легкие, они могут блокировать кровоток, вызывая серьезные проблемы или даже смерть.
ТГВ и ПЭ поражают многих людей в США и во всем мире. Фактически, в США ежегодно проводится более
0 мероприятий VTE. Это больше, чем количество сердечных приступов или количество инсультов, которые случаются каждый год. Прогнозируется, что количество DVT и PE будет продолжать расти, и к 2050 году они, по прогнозам, затронут примерно 1,8 миллиона американцев.
Если у вас тромб (или сгусток крови), ваш врач быстро начнет лечение, чтобы снизить вероятность его попадания в кровоток и блокирования кровотока в артерии в легких.Лечение также может снизить вероятность повторного образования тромба. ТГВ обычно лечат лекарствами, которые обычно называют разжижителями крови. Реже могут использоваться другие методы лечения ТГВ, включая хирургическое вмешательство или лекарства, называемые тромболитиками, которые разрушают тромб. Лечение ПЭ требует применения тромболитиков или хирургического вмешательства в дополнение к антикоагулянтам.
Почему возникают тромбы?
Три основные категории факторов, которые приводят к повышенному риску образования тромбов, известны в медицинском сообществе как Триада Вирхова, названная в честь прусского врача, работавшего в этой области.Факторы:
- Застой крови: Это когда кровоток замедляется или собирается. Это может произойти по ряду причин, включая неподвижность в течение длительного периода, некоторые виды хирургических вмешательств или хронические сердечные заболевания.
- Гиперкоагуляция: Это состояние возникает, когда кровь свертывается или слипается легче, чем обычно. Это может произойти из-за определенных генетических причин, среди прочего, рака, курения, использования оральных контрацептивов и беременности.
- Повреждение сосуда: Это повреждение или травма стенок вен. Травмы могут возникнуть в результате хирургического вмешательства, переломов костей, установки венозного катетера или употребления инъекционных наркотиков.
Факторы риска
Как вы можете себе представить, ТГВ и ТЭЛА могут возникать у пациентов, у которых может быть комбинация факторов, перечисленных выше в триаде Вирхова. Некоторые условия повышают риск образования тромбов у людей:
- Перенесли операцию на колене или бедре.
- Имел травму и / или перелом костей.
- Возраст старше 40 лет.
- При длительном постельном режиме.
- Пострадал от серьезного заболевания, инфекции, сердечного приступа или инсульта.
- Рак.
- Рак, проходит курс химиотерапии.
- Был предыдущий ТГВ или ПЭ.
Симптомы и признаки
ТГВ может не иметь никаких симптомов или включать различные комбинации боли, болезненности, обесцвечивания и отека ног (при нажатии остается вмятина).ПЭ может включать симптомы одышки, кашель (с кровью в мокроте или без нее), боль в груди, учащенный пульс (> 100 ударов в минуту) и субфебрильную температуру. Если сгустки крови в легких вызывают скопление крови в сердце, это может вызвать низкое кровяное давление и шок. Если вы испытываете какие-либо из этих симптомов ТГВ или ПЭ, немедленно обратитесь к врачу.
Своевременное лечение ТГВ и ПЭ может снизить вероятность возникновения другого события. Важно обсудить план лечения с вашим лечащим врачом и узнать, чего ожидать от этого плана лечения.Также важно придерживаться согласованного вами плана и регулярно связываться с вашим лечащим врачом.
Профилактика
Если у вас не было ТГВ или ТЭЛА, но вы думаете, что подвергаетесь повышенному риску из-за факторов, описанных выше, есть несколько способов снизить риск возникновения ТГВ и ПЭ. Поговорите со своим лечащим врачом о своих рисках и обратитесь за помощью по телефону:
- Бросьте курить (если вы курите).
- Похудеть — ожирение является фактором риска ВТЭ, а также может увеличивать риск других факторов риска ВТЭ.
- Станьте активнее — чтобы ваша кровь продолжала двигаться.
Для вас и ваших близких важно знать об этом состоянии, чтобы по возможности снизить риск образования тромбов. Если вы подозреваете ТГВ или ТЭЛА, немедленно обратитесь за медицинской помощью.
Джордж Х. Сэндс, доктор медицины, является старшим медицинским директором компании Pfizer.
[1] [2] [3] [4] [5] [6] [7] [8] [9] [10] [11] [12] [13] [14] [15] [16] ]
Кинетика и механика сокращения сгустка определяются молекулярным и клеточным составом крови | Кровь
Кровотечение и тромботическая окклюзия сосудов являются основными причинами смерти и инвалидности. 1,2 Многое известно о начальных этапах образования тромба и процессах, которые ограничивают его распространение и способствуют растворению. Напротив, мало что известно о процессах, регулирующих сокращение (ретракцию) сгустка. Сокращение сгустка — это активное сдавливание сгустка, которое уменьшает его объем 3,4 , предотвращая кровопотерю 5 и восстанавливая кровоток мимо тромбов, которые в противном случае были бы обструктивными. 6 Важность сокращения сгустка наиболее очевидна при нарушениях, которые влияют на способность тромбоцитов генерировать немышечные миозиновые сократительные силы, таких как дефекты MYH9, которые приводят к увеличению кровотечения и снижению стабильности тромба, связанных с уменьшенной степенью сокращения сгустка, несмотря на нормальная агрегация и секреция тромбоцитов в ответ на агонисты. 7 Множество факторов, которые могут влиять на сокращение сгустка, проиллюстрировано их влиянием на изменения в структуре фибрина. Например, дефицит фактора XIII (FXIII), при котором сшивка фибрина нарушена, может ухудшить заживление ран и привести к преждевременному лизису сгустка и кровотечению. 8 Некоторые формы дисфибриногенемии также приводят к кровотечению, тогда как другие предрасполагают к тромбозу в результате аномальной полимеризации, которая может повлиять на сокращение. 9 Однако роль сокращения сгустка в развитии тромботической окклюзии сосудов и устойчивости к эндогенному и экзогенному тромболизису была исследована только недавно. 10
Сокращение сгустка происходит за счет генерируемых тромбоцитами сократительных сил 5 , которые распространяются через тромбоцитарно-фибриновую сеть 11 и приводят к изгнанию сыворотки. 4 Тромбоциты сокращаются из-за взаимодействия актина 5 и немышечного миозина IIa, которое инициируется, когда тромбоциты активируются различными стимулами, включая тромбин. 12,13 Тромбин превращает фибриноген в фибрин, который собирается в высокоэластичную полимерную сеть, 14-16 , к которой тромбоциты присоединяются через интегрин α IIb β 3 . 17,18 Механические свойства фибрина зависят от сшивки FXIIIa. 19 FXIIIa необходим для того, чтобы произошло сокращение сгустка, 20 частично за счет опосредования транслокации фибрина на богатые сфингомиелином рафты, где он способен колокализоваться с миозином и α IIb β 3. 19 Кроме того, было показано, что перекрестное связывание FXIII важно для удержания красных кровяных телец (RBC) в сокращенных сгустках крови. 21,22
эритроцитов составляют значительную часть тромбов, особенно те, которые образуются в венах. 23 При ряде патологических состояний, таких как серповидно-клеточная анемия (ВСС), повышенный риск тромбоза связан с повышенной жесткостью мембраны эритроцитов. 1,24,25 Однако данные о роли эритроцитов в сокращении сгустка только начинают появляться. Сократительные силы, создаваемые сетью тромбоцитов и фибрина, плотно упаковывают и сжимают эритроциты, что приводит к изменению формы с двояковогнутой на многогранную (так называемые полиэдроциты). 26 Эта деформация эритроцитов наблюдалась in vitro, а также в тромбах у пациентов с инфарктом миокарда с подъемом сегмента ST. 26,27 Уплотнение эритроцитов может помочь герметизировать сгусток, но также может ухудшить проницаемость для активаторов плазминогена, что способствует устойчивости к фибринолизу.Обратный процесс (то есть влияние эритроцитов на сокращение сгустка) практически не изучался.
Несмотря на подразумеваемую медицинскую и биологическую важность сокращения сгустка, пробелы в нашем понимании могут быть объяснены, по крайней мере частично, отсутствием методологии для количественной оценки динамики этого процесса. В этой работе мы непрерывно отслеживали усадку сгустка in vitro, что в сочетании с реометрией давало подробную количественную информацию о динамике сокращения сгустка.Было обнаружено, что кинетика сокращения сгустка является трехфазной, и, варьируя клеточный состав, факторы свертывания и структуру фибрина, можно было проследить влияние состава крови на каждую из фаз сокращения сгустка. Подробная кинетическая и механическая характеристика процесса сокращения сгустка дает возможность лучше определить его роль в тромботической окклюзии сосудов и разработать новые и целенаправленные подходы для обеспечения гемостаза и предотвращения тромбоза.
Без наличия эритроцитов линейная область (фаза 2) на кривой сокращения не наблюдалась даже при более высоком количестве тромбоцитов.Интересно, что при количестве тромбоцитов <150 000 / мкл поведение кривой лучше всего описывалось одним экспоненциальным распадом, тогда как при количестве тромбоцитов> 250 000 / мкл кривая лучше описывалась двумя кривыми экспоненциального распада, где более быстрая фаза сокращения произошла в первые ~ 360 секунд после активации тромбоцитов, за которой следовала более медленная фаза. Повышение концентрации тромбоцитов увеличивало скорость и степень сокращения в образцах с 250 000 до 300 000 / мкл и> 500 000 / мкл тромбоцитов (Таблица 2).
В восстановленных образцах с увеличивающейся концентрацией эритроцитов мгновенная производная выявила точку перехода в течение первых 30 секунд сокращения. Однако из-за его короткой продолжительности не удалось окончательно определить, следует ли этот период линейному или экспоненциальному спаду. При гематокрите> 40% линейная фаза сокращения не только немного удлинялась, но и скорость снижалась более чем наполовину по сравнению с гематокритом <10% (таблица 2).Скорость и степень сокращения в фазе 3 также уменьшались с увеличением гематокрита (таблица 2; дополнительный рисунок 5E). Это также указывает на основной вклад эритроцитов в процесс сокращения многофазного сгустка.
Для дальнейшего изучения влияния механики эритроцитов на процесс сокращения сгустка мы исследовали фазы сокращения образцов цельной крови пациентов с SCD, которые содержали очень жесткие эритроциты.Образцы от пациентов с ВСС показали в среднем 30% снижение скорости сокращения в фазе 2 и 40% снижение константы скорости, связанной с фазой 3, по сравнению с цельной кровью, полученной от здоровых контролей (дополнительная фигура 6).
Считается, что сокращение сгустка играет важную роль в гемостазе и восстановлении кровотока через тромбы, которые в противном случае были бы обструктивными. 4 Хотя многие тромботические нарушения и нарушения свертываемости крови (например, фактор свертывания крови и дефекты функции тромбоцитов) могут быть диагностированы с помощью анализов конечных точек, таких как время свертывания 9 и агрегометрия пропускания света, 36 соответственно, вполне вероятно, что другие упускается из виду 37 , потому что они лучше всего характеризуются изменениями констант скорости или потому, что дефект включает взаимодействия тромбоцитов с фибрином (например, немышечные нарушения миозина IIa тромбоцитов), а не нарушение секреции тромбоцитов или взаимодействия тромбоцитов. 38 Существуют также существенные различия между авидностью активированных тромбоцитов к фибрину по сравнению с фибриногеном, и именно фибрин, а не фибриноген, способствует сборке фибронектина и экспрессии фосфатидилсерина на поверхности тромбоцитов, 39-41 , который усиливает тромбоциты. зависимое образование тромбина и способствует привлечению дополнительных тромбоцитов к участкам образования фибрина, среди других различий. 42 Наконец, нельзя оценить вклад эритроцитов и других компонентов цельной крови в сокращение с помощью анализов конечных точек плазмы.
Результаты нашего исследования показывают, что сокращение сгустка — это динамический процесс, который лучше всего описать следующими тремя кинетически различимыми фазами (рис. 7A): период инициации (фаза 1), за которым следует «линейное сокращение» (фаза 2), а затем стабилизация сгустка (фаза 3). Эти фазы также включают различия в потребностях и вкладе фибриногена и клеточных элементов в оптимизацию. В частности, фаза 1 требует тромбоцитов и фибриногена; фаза 2 требует тромбоцитов, фибриногена и дополнительного присутствия эритроцитов; а фаза 3 требует перекрестного связывания фибрина с помощью FXIIIa.
Рисунок 7
Схема фазовой динамики сокращения тромба. (A) Процесс сокращения сгустка приводит к уменьшению объема сгустка с течением времени. Этот процесс можно условно разделить на 3 фазы: начало сжатия, линейное сжатие и механическая стабилизация. (B) Различные процессы с участием тромбоцитов, фибрина и / или эритроцитов влияют на процесс сокращения сгустка через 3 фазы.(C) Сокращение сгустка обусловлено динамическим равновесием между эффектами основных компонентов крови, которые могут увеличивать или уменьшать степень сокращения.
Рисунок 7
Схема фазовой динамики сокращения тромба. (A) Процесс сокращения сгустка приводит к уменьшению объема сгустка с течением времени. Этот процесс можно условно разделить на 3 фазы: начало сжатия, линейное сжатие и механическая стабилизация. (B) Различные процессы с участием тромбоцитов, фибрина и / или эритроцитов влияют на процесс сокращения сгустка через 3 фазы.(C) Сокращение сгустка обусловлено динамическим равновесием между эффектами основных компонентов крови, которые могут увеличивать или уменьшать степень сокращения.
Из многих исследований ясно, что сократительные белки тромбоцитов и взаимодействия тромбоцитов с фибрином (огеном) необходимы для осуществления общего процесса сокращения. 7,19,43 Здесь мы видим, что эти взаимодействия необходимы для фазы 1 сокращения сгустка.Количество тромбоцитов> 75 000 / мкл; сократительные белки тромбоцитов, исследованные посредством ингибирования немышечного миозина IIa; и взаимодействие тромбоцитов с фибрином (оген), как это было изучено путем добавления RGDS, необходимы для инициирования сокращения сгустка и для продолжения сокращения сгустка после фазы 1. Увеличение количества тромбоцитов с <150 000 / мкл до> 250 000 / мкл увеличивало скорость сокращения в 4,75 раза, а повышение количества тромбоцитов до> 500 000 / мкл увеличивало скорость в 8,75 раза (таблица 2).
Чего не ожидалось, так это сложного взаимодействия между концентрацией фибриногена, количеством тромбоцитов и гематокритом.Повышение концентрации фибриногена> 1 мг / мл нарушает сокращение поперечно-сшитых сгустков, предполагая, что соотношение тромбоцитов / фибрина играет важную роль, вероятно, за счет обеспечения достаточного местного напряжения для повторной сборки фибрин-фибриновых сетей.
Дополнительным доказательством этой интерпретации является открытие, что степень сокращения сгустка обратно пропорциональна гематокриту, как это видно на фазе 2, и, следовательно, вероятности включения эритроцитов в фибриновую сеть.Известно, что эритроциты протромботичны, 44,45 , и тромбоэмболия является основной причиной смерти у некоторых пациентов с повышенным гематокритом (например, истинная полицитемия) и измененной ригидностью эритроцитов и другими механическими свойствами (например, SCD). 46-48 Наличие эритроцитов связано с большим объемом тромба и повышенным уровнем летальности. 49 Однако механизм, с помощью которого эритроциты включаются в сгусток, их роль в сокращении сгустка и литическая резистентность, только начинают оцениваться. 26
Наши результаты показывают, что эритроциты в первую очередь модулируют фазу 2 сокращения сгустка (таблица 2). Включение эритроцитов в сгусток, по-видимому, мешает двухфазному сокращению, очевидному в PRP, которое ранее приписывалось 2 фазам фосфорилирования легкой цепи немышечного миозина IIa, наблюдаемого в тромбоцитах. 50 Наш анализ фазы 2 предполагает, что эритроциты внутри сгустка придают сопротивление сокращению, которое становится более выраженным с увеличением гематокрита и повышенной жесткостью эритроцитов.Это сопротивление приводит к временному снижению сократительных сил, вызванных тромбоцитами.
Похоже, что переход к фазе 3 сокращения происходит, когда сократительные силы, создаваемые тромбоцитами, превышают сопротивление эритроцитов, как показано экспоненциальным сокращением. Линейное сокращение происходит независимо от движущей силы, тогда как экспоненциальное сокращение пропорционально концентрации того, что вызывает сокращение, в данном случае сил, генерируемых тромбоцитами.Увеличение количества тромбоцитов с 250 000 до 300 000 / мкл до> 500 000 / мкл приводит к 2,5-кратному увеличению скорости и двукратному увеличению степени сокращения фазы 3, соответственно (Таблица 2). Таким образом, силы, возникающие при более высоком количестве тромбоцитов, способны преодолевать сопротивление эритроцитов, что демонстрируется уменьшением степени и скорости фазы 3 сокращения при более высоком гематокрите (таблица 2).
Одна замечательная особенность фазы 3 состоит в том, что стабилизация сгустка больше всего зависит от перекрестного связывания фибрина с помощью FXIIIa (Таблица 2), в дополнение к присутствию сократительных белков тромбоцитов и взаимодействий тромбоцитов с фибрином, которые необходимы для более ранних фаз.FXIIIa перемещает фибрин в богатые сфингомиелином рафты, процесс, необходимый для сокращения сгустка, 19 , и увеличивает его жесткость. 51 Когда сшивание FXIIIa блокируется, общая степень сокращения уменьшается (Рисунок 2; Таблица 1), а продолжительность времени, проведенного в фазах 1 и 2, увеличивается (Таблица 2), показывая, что FXIIIa и стабильность сгустка требуется для перехода в фазу 3 и поддержания структуры сгустка фазы 3 (Рисунок 2; Таблица 1), где степень сокращения является наибольшей.
Стабилизация сгустка может быть нарушена объемом эритроцитов, конкуренцией с тромбоцитами за связывание с фибрином, 52 или, возможно, ограничением распространения сократительной силы через фибриновую сеть. Частично этим можно объяснить снижение скорости и степени сокращения в фазе 3 с увеличением гематокрита.
Однако уменьшение сокращения фазы 3, наблюдаемое при более высоких гематокритах, уравновешивалось увеличением генерации сократительной силы, когда количество тромбоцитов поддерживалось постоянным или нормализованным (рис. 6B-C).Маловероятно, что это может быть связано с АДФ, высвобождаемым из эритроцитов, 53 , поскольку ингибирование рецепторов P2Y12 не влияет на процесс сокращения (дополнительный рисунок 4). Напротив, известно, что отдельные тромбоциты механически определяют жесткость окружающего сгустка 5,54 и создают различные сократительные силы на основе этого свойства. 11 Эритроциты уменьшают эластический компонент сгустка (рис. 5D) в масштабе времени, аналогичном началу фазы 3, и могут временно увеличивать сократительную силу, создаваемую тромбоцитами.В совокупности эти результаты показывают, что эритроциты сильно влияют на поведение сокращающихся сгустков главным образом из-за механического, а не биохимического воздействия.
Добавление тромбоцитов и эритроцитов увеличивает вязкие свойства сгустка по сравнению с их эластичным поведением (Рисунки 3C и 5E). Несмотря на аналогичные эффекты на механические свойства сгустка, добавление эритроцитов и тромбоцитов оказывает противоречивое влияние на кинетику процесса сокращения.Вероятно, это связано с тем, что тромбоциты, в дополнение к своим вязкоупругим свойствам, обладают активным сократительным механизмом, тогда как эритроциты обеспечивают пассивное вязкоупругое заполнение фибриновой сетки, сопротивляясь сокращению.
В целом, наши исследования показывают, что сокращение сгустка — это динамический многоэтапный и многофакторный процесс. Отслеживая кинетику сокращения сгустка, мы можем получить подробную информацию о том, как отдельные компоненты крови влияют на каждый этап процесса (рис. 7B).Мы обнаружили, что тромбин, высокое количество тромбоцитов, взаимодействия тромбоцитов с фибрином, перекрестное связывание FXIIIa и активация миозина тромбоцитов усиливают сокращение сгустка, тогда как высокий фибриноген, высокий гематокрит и повышенная жесткость эритроцитов ограничивают степень сокращения сгустка. Баланс этих сил определяет общую степень сжатия (рис. 7C).
Эндогенные или приобретенные факторы, которые ухудшают скорость, степень и стабильность сокращения, могут увеличивать склонность к кровотечению, тогда как быстрое, но менее обширное и более длительное сокращение может нарушать эндогенный или терапевтический фибринолиз.Наши данные подтверждают возможность того, что нарушения эритроцитов, связанные с тромбозом (например, SCD и другие наследственные гемолитические анемии, сопровождающиеся изменениями механических свойств эритроцитов), могут усиливать образование сгустка при уменьшении его сокращения. Могут быть проведены исследования, чтобы увидеть, проявляют ли тромбоциты от пациентов с эссенциальным тромбоцитозом и тромбозом повышенную склонность вызывать сокращение сгустка с нарушением фибринолиза по сравнению с тромбоцитами от пациентов с реактивным тромбоцитозом, и проявляют ли пациенты с эссенциальным тромбоцитозом, у которых имеется фенотип кровотечения, нарушение сокращение сгустка и быстрое растворение сгустка.Основное ограничение тестов на коагуляцию, основанных на времени свертывания, заключается в том, что> 95% всего образования тромбина происходит после точки гелеобразования. 55 Следовательно, некоторые из основных последствий образования тромбина, включая поздние фазы активации тромбоцитов и образования фибрина, а также процесс сокращения сгустка, отсутствуют. Необходимы дополнительные исследования, чтобы определить, обеспечит ли количественная оценка сокращения сгустка новый и клинически важный анализ, позволяющий изучать гемостатические и тромботические нарушения, не выявляемые современными подходами, основанными на анализах конечной точки свертывания.
Онлайн-версия этой статьи содержит дополнение с данными.
Расходы на публикацию этой статьи были частично оплачены за счет оплаты страницы. Таким образом, и исключительно для того, чтобы указать на этот факт, данная статья помечена как «реклама» в соответствии с разделом 18 USC 1734.
Вклад: В.T., R.I.L., D.B.C. и J.W.W. спланированные эксперименты; V.T., R.I.L., A.P.L., A.D.P., T.L. и F.I.A. проведенные эксперименты; V.T., R.I.L., A.P.L., A.D.P., K.L.S., D.B.C. и J.W.W. проанализированные данные; и V.T., R.I.L., D.B.C. и J.W.W. написал рукопись.
Раскрытие информации о конфликте интересов: F.I.A. является аффилированным лицом с HemaCore Ltd., Москва, Россия. Остальные авторы заявляют об отсутствии конкурирующих финансовых интересов.
Для корреспонденции: Джон У. Вайзел, Департамент клеточной биологии и биологии развития, Школа медицины, Университет Пенсильвании, 421 Curie Blvd, BRB II / III, Room 1154, Philadelphia PA 19104-6058; электронная почта: [email protected].
образцов крови: химия и гематология
(Дополнительные инструкции см. В специальных разделах о микробиологических образцах.)
Компоненты крови
В среднем у взрослого мужчины примерно 5 кварт (4.75 литров крови, состоящей из примерно 3 кварт (2,85 литра) плазмы и 2 кварты (1,9 литра) клеток.
Клетки крови взвешены в плазме, которая состоит из воды и растворенных веществ, включая гормоны, антитела и ферменты, которые переносятся в ткани, и продукты клеточных отходов, которые переносятся в легкие и почки.
Основные клетки крови подразделяются на эритроциты (эритроциты), белые клетки (лейкоциты) и тромбоциты (тромбоциты).
Эритроциты — это тонкие круглые вогнутые тела, содержащие гемоглобин, сложное химическое вещество, переносящее кислород и углекислый газ.
Гемолиз происходит, когда тонкая защитная мембрана, покрывающая хрупкие эритроциты, разрывается, позволяя гемоглобину выйти в плазму. Гемолиз может быть вызван грубым обращением с образцом крови, слишком долгим наложением жгута (вызывающим застой крови) или слишком сильным сжатием кончика пальца во время сбора капилляров, разбавления, воздействия загрязнителей, экстремальных температур или патологических состояний.
Основная цель белых клеток — бороться с инфекцией. У здорового человека белые клетки реагируют на незначительные инфекции увеличением количества и уничтожением болезнетворных микроорганизмов. Тромбоциты — это небольшие фрагменты специальных клеток, которые способствуют свертыванию крови.
Плазма или сыворотка могут быть отделены от клеток крови центрифугированием. Существенное различие между плазмой и сывороткой заключается в том, что плазма удерживает фибриноген (компонент свертывания крови), который удаляется из сыворотки.
Сыворотка получается из свернувшейся крови, не смешанной с антикоагулянтом (химическим веществом, препятствующим свертыванию крови). Затем эту свернувшуюся кровь центрифугируют, получая сыворотку, которая содержит два типа белка: альбумин и глобулин. Сыворотку обычно собирают в пестрые красно-серые, золотые или вишнево-красные пробирки с красной крышкой, а иногда используются пробирки с красной крышкой.
Плазма получается из крови, которая была смешана с антикоагулянтом в пробирке для забора крови и поэтому не свернулась.Затем эту смешанную кровь можно центрифугировать, получая плазму, содержащую альбумин, глобулин и фибриноген.
В процессе свертывания крови участвует множество факторов свертывания (фактор VIII, фактор IX и т. Д.). Несколько различных типов антикоагулянтов влияют на активность этих факторов, предотвращая свертывание крови. Для образцов плазмы могут потребоваться как антикоагулянты, так и консерванты. Для назначенного теста необходимо использовать указанный антикоагулянт или консервант. Химическое вещество было выбрано, чтобы сохранить некоторые особенности образца и работать с методом, используемым для проведения теста.Кровь, взятая с одним антикоагулянтом, подходящим для описанного теста, может считаться непригодной для других тестов. Поскольку добавки не являются взаимозаменяемыми, необходимо свериться с полем требований к образцу в описании отдельных испытаний, чтобы определить соответствующие требования к сбору для заказанного испытания.
Контейнеры для сбора / транспортировки крови
Соблюдение инструкций по сбору, подготовке и транспортировке, предложенных LabCorp, обеспечивает наилучшие возможные результаты испытаний.Материалы для надлежащего сбора и транспортировки образцов предоставляются LabCorp. Примечание. Образцы для тестирования LabCorp должны быть собраны в контейнеры для образцов, предоставленные LabCorp.
Антикоагулянты и консерванты . Чтобы гарантировать точные результаты теста, все пробирки, содержащие антикоагулянт или консервант , должны быть заполнены полностью. Попытки нагнетать больше крови в пробирку, оказывая давление, как при взятии с помощью шприца, приведут к повреждению эритроцитов (гемолизу).Если вакуумная трубка не заполняется должным образом, и вы уверены, что вошли в вену правильно, замените другую трубку. Иногда вакуумные лампы теряют свой вакуум. Если образец не может быть собран надлежащим образом, выберите другое место и, используя новое стерильное оборудование для сбора, соберите образец. (Специальное примечание для светло-голубых пробирок [цитрат натрия], используемых для исследований коагуляции: всегда полностью устанавливайте и надежно удерживайте пробирку на втулке Vacutainer® во время заполнения.)
Примечание: Для всех замороженных образцов используйте пластиковые транспортировочные пробирки.
Контейнеры для образцов
Примечание: Пожалуйста, проверьте принадлежности для сбора и транспортировки образцов, чтобы убедиться, что они не включают контейнеров с истекшим сроком годности .
Пробирка с красной крышкой: Не содержит антикоагулянтов и консервантов.
Использование: Сыворотка или свернувшаяся цельная кровь. Сыворотка должна быть отделена от клеток в течение от 45 минут до двух часов в зависимости от теста (ов). См. Требования к образцам для интересующего (-ых) теста, доступные в Справочнике услуг.Отправьте сыворотку в пластиковую транспортную тубу.
Пробирка с пятнистым красным / серым верхом, золотым верхом или вишнево-красным верхом (гель-барьер): Содержит активатор свертывания и гель для отделения сыворотки от клеток, но не антикоагулянт. В , а не в , используйте пробирки с гелевым барьером для отправки образцов для терапевтического мониторинга лекарственных средств. Всегда проверяйте описание теста, чтобы определить, подходит ли трубка с гелевым барьером.
Использование: Сыворотка, может использоваться для анализов, требующих сыворотки, если не указано иное.Отделите сыворотку от клеток в течение от 45 минут до двух часов, в зависимости от теста (ов). См. Требования к образцам для интересующего (-ых) теста, доступные в Справочнике услуг. Сыворотку можно отправлять в центрифужную пробирку с неповрежденным барьером (правильное разделение при центрифугировании) между клетками и сывороткой или в пластиковую транспортную пробирку. Если образец центрифугировать до завершения свертывания, на поверхности клетки образуется фибриновый сгусток. Эта находка часто встречается в гемолизированных образцах.Кроме того, гелевый барьер может быть поврежден и может вызвать неправильное разделение сыворотки и клеток, что может повлиять на результаты теста.
Верхняя трубка бледно-лилового цвета: Содержит K 2 EDTA.
Использование: ЭДТА цельная кровь или плазма. Отправьте плазму в пластиковую транспортную пробирку с надписью «Plasma, EDTA». Отправьте цельную кровь в пробирку с бледно-лиловым верхом.
Трубка с серым верхом: Содержит фторид натрия (консервант) и оксалат калия (антикоагулянт).
Применение: Цельная кровь или плазма фторида натрия. Отправьте плазму в пластиковую транспортную пробирку с надписью «Плазма, фторид натрия». Отправьте цельную кровь в пробирку с серым верхом.
Пробирка с синим верхом (также пробирка с голубым верхом): Содержит цитрат натрия. Обязательно используйте только пробирки с концентрацией цитрата натрия 3,2%. Их легко узнать по желтым диагональным полосам на этикетке.
Применение: Плазма цитрата натрия. Отправьте плазму в пластиковую транспортную пробирку с надписью «Плазма, цитрат натрия.«Отправьте цельную кровь в пробирку с голубым верхом.
Пробирка с зеленой крышкой: Содержит гепарин натрия или гепарин лития.
Применение: Гепаринизированная цельная кровь или плазма. Отправьте плазму в пластиковую транспортную пробирку с надписью «Плазма, гепарин натрия» или «Плазма, гепарин лития». Отправьте цельную кровь в пробирку с зеленым верхом.
Пробирка с желтым верхом: Содержит раствор кислой цитрат-декстрозы (ACD).
Использование: Цельная кровь ACD. Отправьте цельную кровь в пробирку с желтым верхом.
Пробирка Royal blue-top: Содержит натрий-ЭДТА для исследований следов металлов. Некоторые пробирки Royal Blue-Top не содержат ЭДТА.
Использование: ЭДТА цельная кровь или плазма. Отправьте цельную кровь в пробирку с королевским синим верхом. Отправьте плазму в пластиковую транспортную пробирку с надписью «Плазма, ЭДТА королевского синего цвета».
Пробирка с крышкой для загара: Содержит натрий-ЭДТА для анализа крови на свинец.
Использование: Цельная кровь с ЭДТА. Отправьте цельную кровь в пробирку для загара.
Пробирка для подготовки плазмы (PPT ™): Содержит ЭДТА.
Использование: Плазма EDTA для молекулярных диагностических тестов (например, методы полимеразной цепной реакции (ПЦР) и / или амплификации разветвленной ДНК (бДНК)). При центрифугировании между плазмой и клеточными компонентами крови образуется гелевый барьер. Пробирку можно отправить прямо в лабораторию без переноса на вторичную пробирку. Пластиковые пробирки можно замораживать при -80 ° C без риска поломки.
Этот раздел представляет собой руководство для обученных техников по венепункции или флеботомистов и предназначен для обучения людей технике венепункции , а не .При заборе крови соблюдайте все процедуры венепункции, рекомендованные для использования признанными организациями и / или в соответствии с действующими государственными правилами, касающимися практики флеботомии. Институт стандартов клинических лабораторий (CLSI) — отличный ресурс для получения дополнительной информации.
Принадлежности для сборки. Соберите следующие принадлежности: лабораторный халат, перчатки, этикетки, безопасную иглу, иглодержатель, жгут, соответствующие трубки, марлю, спиртовую губку, липкую ленту и контейнер для острых предметов.(См. Рис. 2.) Наденьте лабораторный халат и перчатки. Асептический метод сбора и транспортировки образца крови работает по принципу вакуумной трубки для забора крови. Для венепункции можно использовать двустороннюю иглу или иглу для нескольких проб (обе одноразовые). Обычно используется игла 21 или 22 размера. Острая игла с маленьким отверстием вызывает минимальный дискомфорт пациента; Калибр 22 или 23 — это наименьший размер отверстия (или просвета), рекомендуемый во избежание гемолиза. Длина иглы от 1 до 1½ дюйма обеспечивает такой угол входа, при котором не проникают обе стенки вены и не проникает ткань.
Рисунок 2
Когда требуется более одного образца крови, несколько игл для образцов и вакуумные пробирки делают сбор крови более простым и эффективным. Крошечная резиновая втулка автоматически закрывается, когда вакуумная трубка вынимается из держателя, предотвращая утечку и потерю крови при замене трубок.
Поместите контейнер для острых предметов в пределах досягаемости. Откройте упаковку иглы для одного или нескольких образцов перед пациентом; На этом этапе не разрывает бумажную пломбу для колпачка иглы, а , а не снимает колпачок иглы (стерильный кожух).(См. Рисунок 3.)
Рисунок 3
Рисунок 4
Подготовьте иглодержатель, чтобы надлежащим образом прикрепить безопасную иглу. Перед снятием колпака иглы натяните защитный кожух иглы на держатель. Проденьте иглу в держатель и плотно затяните. (См. Рис. 4.) Следуйте рекомендациям производителя по правильной установке иглы. В некоторых узлах иглы вы можете вставить пробирку для забора крови в держатель, осторожно проталкивая пробирки вперед, пока игла не коснется стопора.Осторожно постучите по трубкам, содержащим добавки, чтобы удалить любой материал, который может приставать к пробке. Осторожно протолкните трубку вперед, пока верхний край стопора не совпадет с направляющей на держателе. Отпустить. Трубка втянется ниже направляющей. Оставьте его в таком положении. На этом этапе игла полностью вставляется в пробку, не прокалывая ее, что предотвращает утечку крови при венепункции и преждевременную потерю вакуума.
Во время венепункции, , а не , заставляйте пациента многократно сжимать и разжимать кулак («накачивание»).Это вызовет перемещение жидкости между веной и окружающей тканью. Это может привести к изменению концентрации определенных аналитов. Чтобы облегчить выделение вены, пациента могут попросить крепко держаться за резиновый мяч, толстый тампон марли и т. Д. Кроме того, никогда не оставляйте жгут на руке более одной минуты, не снимая его. Это может вызвать дискомфорт у пациента, а также может вызвать гемолиз.
Подготовка места прокола. После закрепления жгута и подтверждения выбора лучшей вены визуально и пальпаторно, действуйте следующим образом. Примечание: Если пациенту вводят внутривенные (IV) растворы в одну или обе руки, допустимо проколоть вену на 3–4 дюйма ниже места внутривенного введения.
- За исключением случаев, когда заказан спирт для крови, протрите участок стерильной спиртовой губкой (70% спирт) круговыми движениями изнутри наружу, чтобы отодвинуть загрязнения от места прокола. , а не , обычно используют йодный препарат. Йод может загрязнять образцы для определенных химических тестов.
- Дайте месту прокола высохнуть на воздухе после тампона или высушите его марлей. Если спирт не высохнуть, это может вызвать гемолиз образца. Если рука сухая, вы избежите ужаливания пациента при венепункции.
- Сломайте бумажную печать на колпачке иглы в присутствии пациента и снимите колпачок иглы. Перед использованием иглы визуально осмотрите острие иглы на предмет заусенцев и возможного изменения цвета вдоль стержня иглы. Если на ней есть заусенцы или обесцвечивание, не используйте эту иглу; используйте другую стерильную иглу.
- Закрепите вену. Введите иглу в вену под углом примерно от 15 до 30 градусов.
Рекомендации по отбору единичных и множественных проб. Если требуется только одна сборная трубка, когда вакуум исчерпан и трубка полностью заполнена, освободите жгут и снимите трубку с узла иглы. Накройте иглу кусочком сухой марли и осторожно вытащите иглу.
Рисунок 5
Если требуется несколько образцов, выньте первую пробирку для забора из держателя, как только кровоток прекратится, переверните первую пробирку, чтобы предотвратить свертывание, и осторожно вставьте вторую пробирку в держатель.Проколите диафрагму пробки, протолкнув трубку вперед и запустив вакуумное всасывание. (См. Рис. 5.) Удалите и переверните каждую последующую трубку после ее заполнения. Когда все образцы будут отобраны, снимите всю сборку с руки. Надежно закрепите защитный кожух на игле; убедитесь, что он заблокирован визуально и звуком. Утилизируйте использованную иглу и держатель в контейнер для острых предметов в соответствии с положениями вашего плана контроля воздействия. Не делайте , а не пересчитывать, разрезать или сгибать иглы; выбрасывайте их в контейнер для острых предметов.Повторно используйте иглы , а не .
- Приложите прямое давление к месту прокола. После взятия крови соблюдайте надлежащую технику венепункции, чтобы предотвратить продолжение кровотечения и / или гематомы. Следует обратить внимание врача на сильное кровотечение (более пяти минут). Также следует обратить внимание врача на пробирку для сгустка (например, пробирку с красной крышкой или гель-барьер), которая не свертывается.
Примечание: При взятии нескольких образцов из одной венепункции рекомендуется следующий порядок: (1) стерильные пробирки для культуры крови, (2) пробирки для свертывания крови без добавок (красные), (3) пробирки для коагуляции и пробирки, содержащие цитрат ( синий), (4) пробирки с гелевым барьером и пробирки с добавками (красный), (5) пробирки с гепарином (зеленый), (6) пробирки с ЭДТА (бледно-лиловый, королевский синий), (7) пробирки с кислой цитрат-декстрозой ( желтый) и (8) пробирки, содержащие фторид натрия и оксалат калия (серый).
Примечание: Если кровь необходимо смешать с добавкой (осторожно переверните пробирку от 4 до 10 раз в зависимости от используемой пробирки с образцом), это необходимо сделать сразу после сбора. Вы можете сделать это быстро, пока рука пациента находится в приподнятом положении. Тщательно перемешайте кровь с антикоагулянтом, вращая запястье и осторожно перевернув пробирку 4-10 раз. (См. Рис. 6.) Как можно скорее после взятия крови поставьте вертикально в штатив для пробирок.
Рисунок 6
Рисунок 7
- Промаркируйте пробирки перед пациентом сразу после забора, подтвердив всю необходимую информацию пациенту. (См. Рисунок 7.)
- Если кровь берется для стандартного гематологического исследования, подготовьте мазки крови (мазки крови) сразу после сбора.
- Заполните форму запроса на тестирование, указав время и дату сбора вместе с идентификацией сборщика.
Примечание. LabCorp работает с поставщиками медицинских услуг, чтобы минимизировать общий объем, собираемый у педиатрических и гериатрических пациентов.
Техника переноса шприца при венепункции
Шприц обычно используется с пациентами, которые трудно получить с помощью стандартной процедуры венепункции, включая методы с использованием набора для взятия крови с крыльями безопасности (бабочка). При шприцевом методе венепункция выполняется без прямого подключения к трубке для забора крови.Выполните следующие действия:
- Используйте одноразовые пластиковые шприцы и безопасные прямые иглы или набор для забора крови с крыльями безопасности. Для большинства лабораторных образцов использование пластмассовых шприцев объемом 20 мл позволит получить адекватный образец. Как правило, игла не должна быть меньше 21 калибра.
- Если используются стеклянные шприцы, важно, чтобы цилиндр и поршень были абсолютно сухими. Небольшое количество влаги может вызвать гемолиз. Если стеклянный шприц был автоклавирован, его следует высушить в духовке перед использованием.Методы сушки на воздухе обычно не подходят.
- После взятия крови шприцем активируйте защитную функцию безопасной прямой иглы или безопасного набора для взятия крови с крыльями. Утилизируйте использованную иглу в контейнере для острых предметов в соответствии с положениями вашего плана контроля экспозиции и заполните вакуумные трубки в соответствии с положениями вашего плана контроля экспозиции. Используйте устройство для переноса крови, чтобы заполнить пробирки из шприца.
- Не не нагнетать кровь в пробирку, нажимая на поршень; это может вызвать гемолиз и нарушить соотношение образца и антикоагулянта.
Процедуры подготовки образцов крови
При сдаче образцов крови следует соблюдать два важных правила. Для некоторых тестов, таких как химические процедуры, часто выбирают образцы натощак. Кроме того, поскольку гемолиз мешает выполнению многих процедур, пожалуйста, отправляйте образцы, которые максимально свободны от гемолиза.
Подготовка сыворотки
Подготовка сыворотки из пробирки с красной крышкой. При подготовке образца сыворотки к отправке выполните следующие действия.Обязательно используйте центрифугу, которую LabCorp предоставила для использования в этих разделениях. Для получения дополнительной информации о приготовлении образцов сыворотки просмотрите следующее видео:
1. Возьмите цельную кровь в количестве, в 2 1/2 раза превышающем необходимый объем сыворотки, чтобы можно было получить достаточное количество сыворотки. Пробирка с красной крышкой на 8,5 мл даст примерно 3,5 мл сыворотки после свертывания и центрифугирования. Обозначьте образец соответствующим образом (см. Контейнеры для образцов).
2. Поставьте пробирку для забора крови в вертикальное положение на штатив и дайте крови свернуться при комнатной температуре в течение 30–60 минут. Если свертывания крови не происходит в течение 60 минут, сообщите об этом врачу. Не снимайте пробку трубки , а не .
Рисунок 8
3. После образования сгустка вставьте пробирку в центрифугу пробкой вверх. (См. Рис. 8.) Дайте центрифуге поработать не более 10 минут на скорости, рекомендованной производителем.Продолжительное центрифугирование может вызвать гемолиз. При использовании настольной центрифуги используйте балансировочную трубку того же типа, содержащую эквивалентный объем воды.
4. Выключите центрифугу, если не выключите ее автоматически, и дайте ей полностью остановиться. Не , а не пытайтесь открыть крышку и остановиться вручную или с помощью тормоза. Осторожно извлеките тюбик, не трогая содержимое. Не делайте , а вращайте более 10 минут, если не указано иное.
5. Удалите пробку и аккуратно аспирируйте всю сыворотку из клеток, используя отдельную одноразовую пипетку для каждой пробирки.
Поместите кончик пипетки сбоку от пробирки примерно на ¼ дюйма над слоем клеток. (См. Рисунок 9.)
Не нарушайте клеточного слоя и не переносите какие-либо клетки в пипетку. Если клетки попали в пипетку, повторно центрифугируйте весь образец.
Рисунок 9
Рисунок 10
8. Перенесите сыворотку из пипетки в транспортировочную пробирку. (См. Рисунок 10.) Осмотрите сыворотку на предмет признаков гемолиза и помутнения, подержав ее на свету. Обязательно предоставьте в лабораторию указанное количество сыворотки.
9. Тщательно и четко промаркируйте пробирку всей необходимой информацией или штрих-кодом. Если не указано иное, образцы сыворотки можно отправлять при комнатной температуре. Если заказано несколько тестов, требующих замороженной сыворотки, для каждого теста следует подготовить пластиковую транспортную пробирку.
Контейнеры для сбора / транспортировки крови
Замороженная сыворотка .Если требуется замороженная сыворотка, сразу же поместите пластиковые транспортировочные пробирки (подготовленные выше) в морозильную камеру холодильника. Во время забора образца сообщите своему представителю по обслуживанию, что у вас есть замороженный образец, который нужно забрать. Отдельный замороженный образец должен быть представлен для каждого теста, требующего замороженного образца. Замороженный образец следует хранить в морозильной камере при температуре от 0 ° C до -20 ° C, если для конкретного испытания не требуется замораживание образца при -70 ° C (сухой лед).
- Если вы собираете замороженные образцы в нерабочее время, промаркируйте пробирку перманентным маркером. (Водорастворимые маркеры могут быть смыты при замораживании и транспортировке.) Поместите пробирки в специальный морозильник. Подготовьте пакеты с серебряным гелем, которые поместятся в Хранитель замороженных образцов, убедившись, что они также заморожены. Как можно позже, до того, как ящик будет выставлен, поместите трубку для транспортировки замороженных образцов в Хранитель замороженных образцов между пакетами с серебряным замороженным гелем. Эти контейнеры могут хранить замороженные образцы в замороженном состоянии, но они не могут замораживать образцы при комнатной температуре или охлажденные образцы.Для получения дополнительных сведений см. Инструкции по эксплуатации Frozen Specimen Keeper.
- Поместите контейнер для замороженных образцов, содержащий образцы, в свой сейф в соответствии с предоставленными наглядными инструкциями (см. Ссылку выше). Ваш представитель по профессиональным услугам перенесет транспортировочную трубку из Frozen Specimen Keeper в сухой лед для транспортировки. Хранитель замороженных образцов будет оставлен в вашем сейфе для повторного использования. Образцы для нескольких тестов следует заморозить в разные транспортные пробирки.
Примечание: Некоторые сейфы могут быть слишком маленькими для хранения замороженного образца. Для этих ящиков можно использовать оригинальные контейнеры Transpak.
Пакеты с замороженным гелем. Чтобы обеспечить целостность образцов в теплую погоду, следуйте инструкциям по применению. пакетов с замороженным гелем и сейфовых ящиков для образцов.
Пробирки с гелевым барьером. Пробирки с гелевым барьером (крапчатый красный / серый, золотой или вишнево-красный верх) содержат активатор сгустка и гель для отделения сыворотки от клеток, но не содержат антикоагулянта.При использовании пробирки с гелевым барьером придерживайтесь следующих шагов. В , а не в , используйте пробирки с гелевым барьером для подачи образцов для терапевтического мониторинга лекарственных средств, прямого контроля Кумбса, группы крови и групп крови. Бывают и другие случаи, когда использовать пробирки с гелевым барьером нельзя. Всегда сверяйтесь с описанием теста и Accu Draw® перед сбором.
- Возьмите цельную кровь в количестве, в 2½ раза превышающем необходимый объем сыворотки, чтобы можно было получить достаточное количество сыворотки.Пробирка с красной крышкой на 8,5 мл даст примерно 3,5 мл сыворотки после свертывания и центрифугирования. Обозначьте образец соответствующим образом.
- Осторожно переверните пробирку с гелевым барьером пять раз, чтобы смешать активатор сгустка и кровь.
- Поместите пробирку для забора крови в вертикальное положение на штативе и дайте крови свернуться при комнатной температуре в течение 30–60 минут. (Минимальное время свертывания составляет 30 минут для пациентов с сохранным процессом свертывания.)
- После образования сгустка вставьте пробирку в центрифугу пробкой вверх.Дайте центрифуге поработать 10 минут на скорости, рекомендованной производителем. Продолжительное центрифугирование может вызвать гемолиз. При использовании настольной центрифуги используйте балансировочную трубку того же типа, содержащую эквивалентный объем воды. У не должно быть более 10 минут отжима, если не указано иное.
- Выключите центрифугу, если не автоматически, и дайте ей полностью остановиться. Не не остановить его вручную или тормозом. Осторожно извлеките тюбик, не трогая содержимое.Осмотрите барьерный гель, чтобы убедиться, что он образовал прочное уплотнение между сывороткой и упакованными клетками. Также проверьте сыворотку на наличие признаков гемолиза и помутнения, подержав ее на свету. Обязательно предоставьте в лабораторию указанное количество сыворотки.
- Убедитесь, что на пробирке имеется четкая этикетка со всей необходимой информацией или штрих-кодом.
- Если замороженный образец не требуется, нет необходимости переносить сыворотку в пластиковую транспортную пробирку. Если не указано иное, образцы сыворотки можно отправлять при комнатной температуре.
- Если требуется замороженная сыворотка, перенесите сыворотку с помощью пипетки в пластиковую транспортировочную пробирку. Следуйте инструкциям в Frozen Serum .
Подготовка плазмы. Если требуется плазма, выполните следующие действия.
1. Всегда используйте подходящую вакуумную трубку для тестов, требующих специального антикоагулянта (например, ЭДТА, гепарина, цитрата натрия и т. Д.) Или консерванта.
2. Осторожно постучите по трубке, чтобы удалить приставшую к трубке или стопорной диафрагме добавку.(См. Рисунок 11.)
Рисунок 11
3. Дайте вакуумной трубке полностью заполниться. Отсутствие заполнения пробирки приведет к неправильному соотношению крови и антикоагулянта и приведет к сомнительным результатам и / или результатам анализа QNS.
4. Во избежание свертывания крови смешивайте кровь с антикоагулянтом или консервантом сразу после взятия каждого образца.
5. Чтобы обеспечить адекватное перемешивание, медленно переверните пробирку восемь-десять раз (четыре раза для пробирок с цитратом), осторожно вращая запястьем.
6. Немедленно центрифугируйте образец в течение 10 минут или в соответствии с указаниями производителя пробирки. Не , а не снимают стопор.
7. Выключите центрифугу, если не автоматически, и дайте ей полностью остановиться. Не не остановить его вручную или тормозом. Осторожно извлеките тюбик, не трогая содержимое.
8. Удалите пробку и аккуратно аспирируйте плазму, используя отдельную одноразовую пипетку Пастера для каждой пробирки.
9. Поместите кончик пипетки сбоку от пробирки примерно на дюйма над слоем клеток. Не допускайте нарушения клеточного слоя или переноса каких-либо клеток в пипетку. У не сливается ; используйте пипетку для переноса.
10. Перенесите плазму из пипетки в транспортировочную пробирку. Обязательно предоставьте в лабораторию указанное количество плазмы.
11. Четко и тщательно промаркируйте все пробирки всей необходимой информацией или штрих-кодом.Все пробирки должны быть помечены полным именем пациента или идентификационным номером, как он указан в форме запроса на анализ, или штрих-кодом. Также напишите на этикетке тип поданной плазмы (например, «Плазма, цитрат натрия», «Плазма, ЭДТА» и т. Д.).
12. Если требуется замороженная плазма, немедленно поместите пластиковую транспортировочную трубку (и) в морозильную камеру холодильника и сообщите своему представителю по обслуживанию, что вам нужно забрать замороженный образец.
13. Никогда не замораживайте стеклянные пробирки. Для получения в нерабочее время следуйте инструкциям в разделе Замороженная сыворотка выше.
Подготовка плазмы с использованием пробирки для подготовки плазмы (PPT ™)
- Пробирка для подготовки плазмы BD Vacutainer® (PPT ™) — это пластиковая вакуумная пробирка, используемая для забора венозной крови с целью подготовки неразбавленной плазмы для использования в молекулярно-диагностическом тестировании.
- BD PPT ™ должен иметь комнатную температуру и иметь соответствующую маркировку для идентификации пациента.
- Соберите кровь в BD PPT ™, следуя стандартной процедуре венепункции и взятия проб. Дайте вакуумной трубке полностью заполниться. Отсутствие заполнения пробирки приведет к неправильному соотношению крови и антикоагулянта и может привести к сомнительным результатам и / или результатам анализа QNS.
- Чтобы избежать свертывания крови, осторожно смешайте кровь с антикоагулянтом сразу после взятия каждого образца.
- Для обеспечения надлежащего перемешивания осторожно переверните BD PPT ™ восемь-десять раз, осторожно вращая запястьем.
- После смешивания храните BD PPT ™ в вертикальном положении при комнатной температуре до центрифугирования. Образцы крови следует центрифугировать в течение от 45 минут до двух часов в зависимости от теста (ов). См. Требования к образцам для интересующего (-ых) теста, доступные в Справочнике услуг. Центрифуга BD PPT ™ / образец крови при комнатной температуре и минимум 1100 RCF (относительная центробежная сила) в течение минимум 10 минут в центрифуге с вращающимся ротором. (Использование центрифуги с фиксированным углом ротора не позволяет гелевому барьеру формироваться должным образом и может привести к неполному отделению плазмы от клеточных компонентов.)
- Дайте центрифуге полностью остановиться, прежде чем пытаться удалить пробирки. Осмотрите пробирку, чтобы убедиться, что между плазмой и клеточными элементами образовался гелевый барьер.
- После центрифугирования плазму в BD PPT ™ можно транспортировать в лабораторию без переноса в другую пробирку. Гелевый барьер предотвращает повторное смешивание плазмы с клеточными элементами крови. Пластиковый BD PPT ™ перед отправкой можно заморозить при -80 ° C.
Подготовка предметного стекла для мазка крови (мазка крови)
Мазок крови (обычно называемый мазком крови) может быть важной частью клинического тестирования.При выполнении это позволяет технологу под микроскопом просмотреть фактический внешний вид красных и белых кровяных телец. Хорошо подготовленные пленки можно использовать при проведении дифференциального подсчета лейкоцитов, для исследования морфологии (размера, структуры и формы) красных и белых клеток для определения наличия аномальных клеток, а также для исследования размера и количества тромбоцитов. Распределение клеток, а также их морфология могут быть изменены плохой подготовкой слайдов.
Наиболее подходящий слайд состоит из пленки толщиной ровно в одну клетку для максимальной визуализации всех типов клеток под микроскопом.
Мазки крови могут быть получены из венозной крови (венопункция) или крови при капиллярной пункции. Подготовка слайдов с использованием венозной крови описана ниже.
Подготовка слайдов с использованием венозной крови, взятой из венепункции
Выполните шаги, описанные ниже.
1. Надеть лабораторные средства индивидуальной защиты.
2. Выберите два чистых, обезжиренных стеклянных предметных стекла с матовыми краями (по возможности, новые).
3. Напечатайте имя пациента и дату на матовых концах обоих слайдов. (См. Рисунок 12.)
Рисунок 12
4. Берите все слайды только за матовые края или края.
5. Поместите предметные стекла матовой стороной вверх и вправо на мягкую плоскую поверхность рядом со стулом или кроватью, где будет собираться образец.
6. Сразу после извлечения иглы из вены осторожно прикоснитесь кончиком иглы к одному из чистых слайдов, образуя небольшую каплю крови диаметром 1-2 мм, размером примерно со спичечную головку. Капля крови должна быть по средней линии, примерно на дюйма от замороженного края. Повторите то же самое для второго слайда коллекции. Включите функцию безопасности иглы и выбросьте иглу в контейнер для острых предметов.
7. Удерживайте левый угол предметного стекла большим и указательным пальцами левой руки.
8. Возьмите расширитель за матовый конец между большим и указательным пальцами правой руки.
9. Расположите левый конец расширителя под углом 45 °, примерно на ½ дюйма напротив капли крови на предметном стекле. Этот угол предотвращает скопление белых клеток по краям.
Рисунок 13
Рисунок 14
10. Постепенно отведите распределительную рамку к капле крови. Когда слайд соприкасается с каплей, кровь начинает распространяться к краям слайдера.(См. Рисунок 13.)
11. Держите салазки разбрасывателя под углом 45 °, сохраняя легкое, но сильное давление, прижимая салазки разбрасывателя к горизонтальным салазкам. Быстро протолкните распределитель по всей длине слайда, вытягивая за собой тонкий мазок крови. Зазубренный край обычно характеризует хороший мазок крови. Кровь не должна выходить за 3 / 4 длины предметного стекла. (См. Рисунок 14.)
12. Таким же образом приготовьте вторую пленку.
13. Дайте мазкам крови высохнуть на воздухе. У не дуновение на горки. Не применяйте фиксатор , а не . После того, как слайды полностью высохнут, поместите их в маркированный держатель для слайдов для транспортировки в лабораторию.
Особые примечания по подготовке слайдов
1. Запрещается прикасаться к предметным стеклам какой-либо областью, кроме длинных краев предметного стекла или матовых концов.
2. Приготовьте пленку немедленно, как только капля крови окажется на предметном стекле. Любая задержка приведет к ненормальному распределению лейкоцитов, при этом многие из более крупных лейкоцитов будут скапливаться на тонких краях мазка.Также будут возникать руло красных кровяных телец (складывание в стопку, как груды монет) и скопление тромбоцитов.
3. Критерии:
- Тонкая часть должна быть около 1 дюйма в длину, а вся пленка должна покрывать примерно половину площади всего слайда.
- Ни одна часть пленки не должна доходить до краев слайда.
- На пленке не должно быть волн, отверстий и выступов, она должна иметь гладкий вид и неровные края.
- Все предметные стекла для микроскопии, а также парафиновые блоки должны иметь четкую маркировку с использованием двух идентификаторов пациента.
- Обозначение образца, используемое в отчете о патологии, должно включать тип случая, год и уникальный номер доступа.
4. Распространенные причины плохого мазка крови. (См. Рисунок 15.)
Рисунок 15
- Слишком большая задержка в переносе капли свежей крови из пробирки для сбора на предметное стекло.
- Капля крови слишком большая или слишком маленькая (обычно слишком большая).
- Раздвижной суппорт рывками толкается поперек суппорта.
- Жирные или грязные направляющие, или использование распределителя с сколами или неотшлифованными краями.
- Невозможность прижать весь край разбрасывателя к направляющей при изготовлении пленки.
- Несоответствие или отклонение разбрасывателя под углом примерно 45 °. (При увеличении угла получается толстая пленка, а при меньшем — тонкая пленка.)
- Не удалось полностью протолкнуть салазки разбрасывателя по плоской салазкам.
Культура крови
Культуры крови следует собирать непосредственно во флаконы для культур крови, предоставленные LabCorp.Следуйте инструкциям, прилагаемым к комплекту, и позвоните представителю LabCorp, если у вас возникнут какие-либо вопросы. Вы также можете перейти к описанию теста для посева крови, рутинный [008300] в онлайн-каталоге LabCorp и обратиться к Руководству по сбору и транспортировке микробиологических образцов , приложенному в поле «Связанные документы», для получения дополнительной информации о сборе образцов для посева крови.
Инъекция плазмы, обогащенной тромбоцитами (PRP): как это работает
В последние годы врачи узнали, что организм обладает способностью к самовосстановлению.Плазмотерапия, обогащенная тромбоцитами, — это форма регенеративной медицины, которая может использовать эти способности и усилить естественные факторы роста, которые ваше тело использует для заживления тканей.
Что такое плазма и что такое тромбоциты?
Плазма — жидкая часть цельной крови. Он состоит в основном из воды и белков и обеспечивает среду для циркуляции красных кровяных телец, лейкоцитов и тромбоцитов в организме. Тромбоциты, также называемые тромбоцитами, представляют собой клетки крови, которые вызывают образование тромбов и другие необходимые функции заживления роста.
Активация тромбоцитов играет ключевую роль в естественном процессе заживления организма.
Что такое плазма, обогащенная тромбоцитами (PRP) и что такое инъекции PRP?
Терапия с использованием обогащенной тромбоцитами плазмы (PRP) использует инъекции концентрации собственных тромбоцитов пациента для ускорения заживления поврежденных сухожилий, связок, мышц и суставов. Таким образом, инъекции PRP используют собственную систему исцеления каждого отдельного пациента для улучшения опорно-двигательного аппарата.
Для приготовления инъекцийPRP нужно взять от одной до нескольких пробирок с вашей собственной кровью и пропустить ее через центрифугу для концентрирования тромбоцитов.Затем эти активированные тромбоциты вводятся прямо в поврежденную или больную ткань. Это высвобождает факторы роста, которые стимулируют и увеличивают количество репаративных клеток, которые производит ваше тело.
Иногда для направления инъекции используется ультразвуковая визуализация. На фотографиях ниже показана инъекция PRP в разорванное сухожилие пациента. Слева показано ультразвуковое руководство, справа — инъекция.
Видео: Как работают инъекции богатой тромбоцитами плазмы?
В этом видео врач спортивной медицины HSS Брайан Д.Халперн обсуждает и демонстрирует инъекции PRP.
Плазма, богатая тромбоцитами, значительно улучшает процесс заживления, и использование PRP инъекции при боли в плече, вызванной разрывами вращающей манжеты, при разрывах ахиллова сухожилия и других травмах мягких тканей, становится все более распространенным.
Также было продемонстрировано, чтоPRP улучшает функцию и уменьшает боль у людей с тендинитом или хроническими состояниями тендиноза, такими как теннисный локоть или локоть игрока в гольф.
Некоторые из ключевых преимуществ инъекций PRP заключаются в том, что они могут снизить потребность в противовоспалительных или более сильных лекарствах, таких как опиоиды. Кроме того, побочные эффекты инъекций PRP очень ограничены, потому что, поскольку инъекции создаются из вашей собственной крови, ваше тело не будет их отвергать или отрицательно реагировать на них. Узнайте больше об инъекциях PRP из статей и других материалов ниже или найдите лучшего врача, который выполняет инъекции PRP в HSS в соответствии с вашим конкретным состоянием и страховкой.
Назад в игру Истории пациентов
Патент США на микрофлюидные устройства и методы для выполнения разделения сыворотки и перекрестного сопоставления крови Патент (Патент № 11016108, выданный 25 мая 2021 г.)
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ Область техникиЭто изобретение в основном относится к устройствам, аппаратам и способам отделения сыворотки от цельной крови и усиления реакций агглютинации в микрофлюидных устройствах.Реакции агглютинации с участием антиген: реакции антитела полезны при перекрестном сопоставлении при переливании крови.
Описание предшествующего уровня техникиАнализ крови перед переливанием или для клинической оценки основан на диагностических устройствах, таких как устройства для перекрестного сопоставления или определения группы крови, а также мониторы химического состава крови, которые измеряют метаболиты, такие как глюкоза или холестерин. В таких устройствах часто должна использоваться сыворотка — неокрашенная жидкая часть крови, содержащая аналиты, представляющие интерес для клиницистов.Образцы сыворотки отделяются от цельной крови перед анализом для удаления эритроцитов и факторов свертывания, которые могут мешать перекрестным реакциям агглютинации, колориметрическим тестам, а также вносить вклад в зависящие от гематокрита различия между образцами. Следовательно, перед тестированием требуется операция предварительной обработки, в которой образец крови разделяется на сыворотку и сгусток, содержащий эритроциты.
При обычном методе отделения сыворотки образец цельной крови помещается в пробирку для забора крови, дает возможность свернуться и подвергается разделению центрифугированием, что позволяет собрать фракцию сыворотки.Однако в диагностическом анализе произошел резкий переход от макромасштаба к микромасштабу, когда требования к объему образца снизились с миллилитров до микролитров, что позволило сократить время анализа с часов до минут. Традиционный метод отделения сыворотки, требующий центрифугирования образца, очевидно, не поддается адаптации на микромасштабах. Поскольку разработка микрожидкостных диагностических устройств продолжает оставаться в центре внимания конкурентных исследований, существует игнорируемая потребность в улучшении подготовки образцов для анализа.Чтобы адаптировать эти устройства для клинической диагностики, необходимы специальные функции для получения сыворотки, отделенной от эритроцитов и факторов свертывания крови.
Введение крови в виде уплотненных эритроцитов или цельной крови часто имеет решающее значение при лечении травм, гиповолемического шока, анемии и нарушений свертывания крови. Переливание крови обычно требует характеристики донорской крови, чтобы она соответствовала группе крови ABO донора и реципиента, или, в более общем смысле, требует анализа перекрестного соответствия.Это делается для предотвращения гемолитической реакции переливания, при которой эритроциты, имеющие основной антиген несовместимости, непреднамеренно вводятся реципиенту, имеющему антитело к этому антигену, а также для избежания второстепенной побочной реакции, при которой антиген эритроцитов в крови реципиента оказывается атакован антителами в плазме донора. Переливание несоответствующей крови может привести к серьезным последствиям, таким как почечная недостаточность или разрыв селезенки.
В настоящее время медицинские техники на местах не имеют доступа к простым и точным средствам оценки пары донор и реципиент на предмет возможных реакций переливания крови во время оказания неотложной медицинской помощи, например, во время военных операций.Анализы агглютинации в пробирках в настоящее время используются перед переливанием крови, однако эти анализы громоздки и включают подготовку эритроцитов и длительное время инкубации. Эти анализы не всегда могут приводить к стабильным результатам в зависимости от опыта специалиста. Кроме того, у некоторых технических специалистов нет доступа к лаборатории, квалифицированной для проведения анализов агглютинации. Следовательно, в данной области техники существует острая потребность в устройстве для перекрестного сопоставления крови, которое было бы быстрым и простым в использовании и, следовательно, пригодным для оценки совместимости переливания крови донора и реципиента во время оказания неотложной медицинской помощи.Настоящее изобретение удовлетворяет эти потребности и обеспечивает дополнительные связанные с этим преимущества.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕВ одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает микрожидкостное устройство, пригодное для любого числа приложений, например для отделения фракции сыворотки от образца цельной крови. В одном варианте осуществления микрофлюидное устройство включает: а) микрофлюидный канал, имеющий первый конец и второй конец; б) впускное отверстие для пробы, гидравлически соединенное с первым концом микрофлюидного канала, сконфигурированного для приема пробы крови; и c) композитная мембрана, расположенная между входом для образца и первым концом микрофлюидного канала, причем композитная мембрана способна активировать свертывание крови и удалять выбранные частицы из крови; и d) дополнительный встроенный в устройство насос, соединенный по текучей среде со вторым концом микрожидкостного канала.В некоторых вариантах осуществления присутствует дополнительный насос на устройстве. В другом варианте композитная мембрана микрофлюидного устройства включает по меньшей мере две мембраны. В другом варианте композитная мембрана включает фильтр из стекловолокна. В другом варианте композитная мембрана включает фильтр из стекловолокна и пористую мембрану. В другом варианте композитная мембрана также включает активатор свертывания крови.
В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает микрофлюидные картриджи и устройства, которые могут использоваться для ряда различных анализов, в том числе для оценки перекрестного соответствия донора крови и реципиента крови.В одном варианте осуществления микрожидкостный картридж или устройство включает: a) подсхему разделения жидкости, которая включает: i) микрожидкостный канал, имеющий первый конец и второй конец; ii) вход для пробы, гидравлически соединенный с первым концом микрофлюидного канала, сконфигурированный для приема пробы крови; iii) композитная мембрана, расположенная между входом для образца и первым концом микрофлюидного канала, при этом композитная мембрана способна активировать свертывание крови и удалять выбранные частицы из крови; и iv) дополнительный встроенный в устройство насос, соединенный по текучей среде со вторым концом микрожидкостного канала; и b) подсхема смешивания растворенных веществ, которая включает в себя: i) змеевидный канал смешивания, причем указанный канал смешивания имеет первый конец и второй конец и имеет критическую длину для обеспечения возможности смешивания растворенных веществ за счет диффузии; ii) первый и второй впускные каналы, соединенные по текучей среде с указанным первым концом указанного смесительного канала в ступенчатом соединении; упомянутый первый впускной канал для транспортировки первой текучей среды и упомянутый второй канал для транспортировки второй текучей среды; при этом указанное ступенчатое соединение выполнено с микропассивным клапаном для одновременного выпуска указанной первой и второй текучих сред в указанный канал смешения; iii) канал ниже по потоку, соединенный по текучей среде со вторым концом указанного канала смешения, причем канал ниже по потоку имеет ширину, превышающую ширину канала смешения; iv) насос для контролируемого инициирования потока текучей среды через упомянутый микропассивный клапан, при этом упомянутый насос гидравлически соединен с упомянутым выходным каналом и инициирует поток за счет хода всасывания; и v) вентиляционное отверстие, оканчивающееся указанным нижерасположенным каналом.В некоторых вариантах осуществления присутствует дополнительный насос на устройстве. В другом варианте осуществления микрожидкостный картридж дополнительно включает третий впускной канал, соединенный по текучей среде с первым концом смесительного канала на ступенчатом соединении; третий впускной канал для транспортировки третьей текучей среды в указанную промежуточную зону. В еще одном варианте осуществления микрожидкостного картриджа подсхема разделения жидкости и подсхемы смешивания растворенных веществ соединены по текучей среде. В другом варианте осуществления изобретения композитная мембрана включает по меньшей мере две мембраны.В другом варианте осуществления изобретения композитная мембрана включает стеклянный фильтр. В другом варианте осуществления изобретения композитная мембрана включает стеклянный фильтр и пористую мембрану. В другом варианте изобретения композитная мембрана включает активатор свертывания крови.
Также предусмотрены методы использования микрофлюидных устройств для отделения сыворотки от образцов крови и для перекрестного сопоставления образцов донора и реципиента.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙРИС.1 представляет собой схематический вид, иллюстрирующий работу первого варианта микрожидкостного устройства в соответствии с аспектами настоящего изобретения.
РИС. 2A-B — виды в разрезе, иллюстрирующие работу второго и третьего вариантов микрожидкостного устройства в соответствии с аспектами настоящего изобретения.
РИС. 3 — схематический вид, иллюстрирующий работу четвертого варианта микрожидкостного устройства в соответствии с аспектами настоящего изобретения.
РИС. 4 представляет собой схематический вид типичных схем микрожидкостного анализа настоящего изобретения.
РИС. 5 является схемой второго варианта осуществления схем микрожидкостного анализа настоящего изобретения.
РИС. 6 показаны результаты реакций перекрестного сопоставления между различными донорами и реципиентами с использованием микрофлюидного устройства по настоящему изобретению.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕВ одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает микрофлюидное устройство, сконфигурированное для подготовки образца сыворотки для анализа, и способы его использования.Устройство способно способствовать свертыванию крови и управлять потоком пробы жидкости, чтобы подготовить отделенную пробу сыворотки. В устройстве используется композитная мембрана, которая способна обеспечить матрицу для удержания образца крови на месте, способствуя коагуляции. В различных вариантах осуществления устройства дополнительно используется множество микрожидкостных каналов, впускных отверстий, клапанов, насосов и других элементов, расположенных в различных конфигурациях.
В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает микрофлюидные картриджи и устройства, сконфигурированные для проведения оценок перекрестного соответствия образцов крови от донора и реципиента, а также способы их использования.Цельная кровь от предполагаемого реципиента первоначально подается в подсистему жидкости, которая включает композитный фильтр, предназначенный для обеспечения коагуляции на картридже и отделения частиц, тем самым обеспечивая изолированную пробу сыворотки для оценки перекрестного соответствия. Упакованные эритроциты или цельная кровь из донорской единицы и отделенная сыворотка от предполагаемого реципиента добавляются в отдельные впускные каналы подсхемы смешения микрожидкостного картриджа по настоящему изобретению. Образцы донора и реципиента контактируют в параллельном диффузионном интерфейсе, созданном в змеевидном канале подсхемы смешения.Распространение растворенных веществ между образцами в канале смешивания приводит к иммунному связыванию и видимым реакциям агглютинации, если группы крови донора и реципиента несовместимы. Канал управления потоком ниже по потоку, размер которого больше, чем у змеевидного смесительного канала, модулирует и увеличивает скорость потока жидкости, тем самым усиливая реакции иммунного связывания и агглютинации. В реакциях, продолжающихся до десяти минут, агглютинация из-за несовместимости между донором и реципиентом крови легко определялась визуально с использованием микрофлюидных картриджей по настоящему изобретению.Если агглютинации не наблюдалось, то донор крови и реципиент совместимы.
1. ОпределенияЭти определения предоставлены для помощи в интерпретации формулы изобретения и описания в данном документе. Если работы цитируются посредством ссылки и содержащиеся в них определения несовместимы с приведенными здесь, определение, используемое в нем, должно применяться только к цитируемым произведениям, а не к настоящему раскрытию.
Микрожидкостный картридж: «устройство», «карта» или «чип» с внутренними мезоструктурами для работы с текучей средой, имеющими по меньшей мере один размер менее 500 мкм.Эти текучие структуры могут включать, например, микрофлюидные каналы, камеры, клапаны, вентиляционные отверстия, переходные отверстия, насосы, входные отверстия, ниппели и средства обнаружения.
Микрожидкостный канал: здесь используется закрытый канал или проход для жидкости, имеющий размер по оси z менее 500 мкм, более предпочтительно менее или около 250 мкм и наиболее предпочтительно около или менее 100 мкм (около 4 мил), а площадь поперечного сечения шире, чем глубина. Самый узкий размер, также называемый «критическим размером», канала оказывает наиболее сильное влияние на поток, число Рейнольдса, перепад давления, а в устройствах, описанных здесь, наиболее узким размером обычно является z-размер или диаметр.
Микрожидкостные каналы с обычно прямоугольным поперечным сечением характеризуются размерами x, y и z. Размер x принимается как длина «L» канала вдоль оси потока, размер y — как ширина, а размер z — как глубина. При формовании литьем под давлением свод и стенки канала обычно соединяются радиусом. Некоторые микрофлюидные каналы имеют круглое поперечное сечение и характеризуются диаметром. Возможны и другие формы.
Следует признать, что слова «верх», «низ», «верхний», «нижний», «сторона», «крыша», «пол», «основание» и «горизонтальный», используемые здесь, являются относительными терминами. и не обязательно описывать ориентацию устройства или компонентов устройства по отношению к плоскости земной поверхности, если это явно не указано.Использование устройств, расположенных на поверхности стола, не является ограничивающим, и ось z обычно выбирается перпендикулярной основной плоскости корпуса устройства только для удобства при объяснении и изготовлении.
Пальцевый (сильфонный) насос: представляет собой устройство, образованное в виде полости, часто цилиндрической формы, покрытой гибкой растяжимой диафрагмой, с входным входом для микрофлюидного канала и выходным выходом, соединенным с полостью по текучей среде. Во время работы, поместив выпускное отверстие в качестве выпускного отверстия, диафрагму можно прижать без создания перепада давления в полости, но при закрытии вентиляционного отверстия и высвобождении упругой диафрагмы создается импульс давления всасывания, который находит применение при всасывании жидкости. через входной микрофлюидный канал.В устройствах по настоящему изобретению импульс всасывания такого типа служит для инициирования анализа путем инициирования потока жидкости через ограничитель капилляров; импульс всасывания, однако, не требуется или не желателен для поддержания потока жидкости, который приводится в действие за счет капиллярности пассивного потока, как только входящий в поток микрофлюидный канал смачивается.
Поверхностно-активные вещества: амфифильные молекулы, которые снижают поверхностное и межфазное натяжение жидкости, собираясь на границе раздела, что позволяет легче растекаться по твердой поверхности и уменьшать угол смачивания.Предполагаются анионные, катионные, цвиттерионные, неионные и фторфильные поверхностно-активные вещества. Анионные поверхностно-активные вещества включают диоктилсульфосукцинат натрия (например, Aerosol OT-75), продаваемый CYTEC Industries. Неионные поверхностно-активные вещества включают полисорбаты (например, полисорбат 80), лауриловый эфир полиоксиэтилена, н-лаурил-ß-D-мальтопиранозид (LM), цетиловый эфир, стеариловый эфир и нонилфениловый эфир, Tween® 80, Triton® X-100, и другие поверхностно-активные вещества. В качестве неионогенных поверхностно-активных веществ можно использовать простой полиоксиэтиленалкиловый эфир, полиоксиэтиленалкилфениловый эфир, конденсат полиоксиэтилена и полиоксипропилена, сложный эфир ацилполиоксиэтиленсорбитана, алкилполиоксиэтиленовый эфир, н-додецил-ß-D-мальтозид, монолаурат сахарозы, простой феноксиэтиленлауриловый эфир, полиэтиленлауриловый эфир. алкилентрибензилфениловый эфир, пара-октилфениловый эфир полиоксиэтиленгликоля, эфир полиоксиэтиленового высшего спирта, сложный эфир полиоксиэтиленовой жирной кислоты, сложный эфир полиоксиэтиленсорбитана и жирной кислоты, сложный эфир сорбитана и жирной кислоты, полиоксиэтиленсорбитол, сложный эфир жирной кислоты, полиоксиэтиленалкиламин, сложный эфир глицерина и жирной кислоты, Используют октил-ß-D-тиоглюкозид, цетиловый эфир (C16), лауриловый эфир (C12), олеиловый эфир, бегениловый эфир (C20), монолаурат полиоксиэтилена и т.п.Коммерчески доступные неионные поверхностно-активные вещества этого типа включают Igepal® CO-610, продаваемый GAF Corporation; и Triton® CF-12, X-45, X-114, X-100 и X-102, продаваемые компанией Dow Chemical Company; Tergitol®15-S-9, продаваемый Union Carbide Corporation; PLURAFAC® RA-40, продаваемый BASF Corp; Neodol® 23-6.5 продается компанией Shell Chemical Company и Kyro EOB продается компанией Procter & Gamble. Амфотерные или цвиттерионные поверхностно-активные вещества также полезны для обеспечения моющих, эмульгирующих, смачивающих и кондиционирующих свойств.Типичные амфотерные поверхностно-активные вещества включают амиды жирных кислот аминокислот (такие как Amisoft® LS-11 и HS-21 производства Ajinomoto), N-коко-3-аминопропионовую кислоту и соли кислот, соли N-таллового-3-иминодипропионата. А также динатриевая соль N-лаурил-3-иминодипропионата, гидроксид N-карбоксиметил-N-кокоалкил-N-диметиламмония, гидроксид N-карбоксиметил-N-диметил-N- (9-октадеценил) аммония, (1-карбоксигептадецил) — гидроксид триметиламмония, гидроксид (1-карбоксиундецил) триметиламмония, натриевая соль N-кокоамидоэтил-N-гидроксиэтилглицина, натриевая соль N-гидроксиэтил-N-стеарамидоглицина, натриевая соль N-гидроксиэтил-N-лаурамидо-ß-аланина, N-коко натриевая соль -гидроксиэтил-β-аланина, а также смешанные алициклические амины и их этоксилированные и сульфатированные натриевые соли, натриевая соль гидроксида 2-алкил-1-карбоксиметил-1-гидроксиэтил-2-имидазолиния или свободная кислота, в которой алкильная группа может быть нонилом, ундецилом или гептадецилом.Также пригодны динатриевая соль 1,1-бис (карбоксиметил) -2-ундецил-2-имидазолиния гидроксида и конденсат олеиновой кислоты и этилендиамина, пропоксилированная и сульфатированная натриевая соль. Амфотерные поверхностно-активные вещества на основе оксидов амина также могут быть использованы. Этот список ни в коем случае не является исчерпывающим или ограничивающим.
Поверхностно-активные вещества могут быть добавлены к реагенту для изменения поверхностного натяжения реагента или добавлены к твердому субстрату для изменения межфазного натяжения субстрата. Во время формования пластмассового изделия с добавкой поверхностно-активного вещества достаточное количество молекул поверхностно-активного вещества мигрирует к поверхности субстрата, процесс, называемый «вспучиванием», с тем, чтобы получить поверхность с низким углом смачивания.Процесс описан в заявке на патент США 2008/0145280 на имя Bookbinder, которая полностью включена в настоящий документ посредством ссылки.
Поверхностно-активные вещества, используемые в качестве добавок к пластмассам для обеспечения гидрофильных свойств поверхности, включают полиэтиленоксид, полипропиленоксид, нонилфенолэтиоксилат и модифицированный полиалкиленоксидом гептаметилтрисилоксан, натриевые или аммониевые соли нонилфенолэтоксилсульфоновой кислоты, лаурилсульфат натрия, лаурилдиогеат натрия и 2-этилсульфат натрия. сукцинат и ионные соли 2-акриламидо-2-метилпропансульфоновой кислоты, N-винилкапролактама, капролактонакрилата, N-винилпирролидона и сульфатных и акриловых мономеров, например.
«Смачиватели с низким ГЛБ (гидрофильно-липофильным балансом)» — это подкласс поверхностно-активных веществ, предпочтительных в настоящем изобретении для покрытия пластиковых поверхностей с целью уменьшения краевого угла смачивания и времени смачивания. Смачивающий агент с низким ГЛБ по изобретению может быть анионным, катионным, цвиттерионным или неионогенным смачивающим агентом, причем последнее является предпочтительным. Номера HLB меньше или равные 6 являются предпочтительными; смачивающие агенты этого типа при первой сушке до поверхности по существу не растворяются при воздействии водного реагента, но могут применяться, например, со спиртами.Смачивающий агент по изобретению также может быть смесью двух или более смачивающих агентов. Кандидаты включают сложные эфиры C12-C20 жирных кислот сахарозы или ксилозы, глицериды сахарозы, сложные эфиры жирных кислот и полиоксиэтилена, сложные эфиры жирных спиртов и полиоксиэтилена, сложные эфиры сорбитана, сложные эфиры полиоксиэтиленсорбитана, сложные спирт-полиглицидные эфиры и глицерид-полиглициды. также включая, например, Pluronic® L121, Pluronic® L122, PEO (2) цетиловый эфир (Brij® 52), PEO (2) стеариловый эфир (Brij® 72), моноолеат сорбита (Span.® 20), тристеарат сорбита (Span® 65), диолеат PEO (200) (Maypeg® 200), моностеарат сорбита, моностеарат глицерина, сложные эфиры сахарозы, алкилнафталинсульфонат натрия (Alkanol® B), N-октадецил -динатрийсульфосукцинамат (Aerosol® 18), жирный эфир полиоксиалкилена (Nonisol® 250), диметилоктиндиол (Surfynol® 102), диметилгексиндиол и т.п.
Капиллярное давление или «капиллярное действие» описывает давление или движение жидкости под этим давлением, соответственно, также называемое «капиллярностью», и относится к тенденции жидкости в микрожидкостном канале продвигаться или отступать в канале так, чтобы для минимизации общей свободной поверхностной энергии системы жидкость / канал / пар.Например, жидкость с низким поверхностным натяжением будет продвигаться, чтобы «смачивать» канал, сделанный из материала с высокой поверхностной энергией, такого как стекло. При введении в микрожидкостный канал жидкости с вогнутым мениском будут стремиться продвигаться по каналу, а жидкости с выпуклым мениском будут иметь тенденцию отступать. Таким образом, капиллярность — это управляемая сила, приводящая к смачиванию и пассивному течению водной жидкости в гидрофильном микрофлюидном канале.
Время «смачивания»: относится к измерению времени, необходимого для того, чтобы жидкость продвинулась на стандартную длину в микрожидкостном канале с заданной геометрией и характеристиками поверхности (обычно в мм / с).Скорость «смачивания» относится к мгновенной скорости продвижения фронта жидкости в микрожидкостном канале в единицах объема в единицу времени (мкл / мкс) и может модулироваться обработкой поверхности и контролем геометрии канала. Пассивный поток, управляемый смачиванием ниже по потоку, можно использовать для управления скоростью потока выше по потоку.
Здесь, где заявлено «средство для функции», следует понимать, что объем изобретения не ограничивается режимом или режимами, показанными только на чертежах, но также охватывает все средства для выполнения функции, которые описанные в этой спецификации, и любые эквивалентные средства.
Средства для изготовления: Методы изготовления включают лазерную трафаретную печать, ламинирование, тиснение, штамповку, литье под давлением, маскирование, травление, фотокаталитическую стереолитографию, мягкую литографию и т. Д. Или любую комбинацию вышеперечисленного. Каждый картридж может состоять из пары элементов или слоев, склеенных или сплавленных вместе, или из множества слоев, склеенных или сплавленных вместе. Термин «слой» относится к любому из одного или нескольких в целом плоских элементов твердой подложки или клеевых слоев, содержащих картридж; «Слои» также включают в себя отдельные листы, рулон и любые литые корпусные элементы, сформированные как обычно плоские элементы.Слои могут быть соединены с помощью клея, чувствительного к давлению (PSA) или термоклея. В качестве альтернативы они могут быть сплавлены под давлением с использованием тепла, растворителя или ультразвуковой сварки. Количество слоев в устройстве будет зависеть от требуемых функций и выбранного процесса изготовления.
Пластик является предпочтительным материалом для создания микрофлюидных устройств согласно настоящему изобретению. Пластмассы, которые могут быть использованы, включают олефины, циклические полиолефины, сополимеры циклических олефинов, полиэфиры, полиэтилентерефталат, полибутилентерефталат, полистиролы, поликарбонаты, полипропилен, полиэтилен, полиуретан, полиэфирсульфон, поливинилхлорид, поливинилацетат ( ПММА), политетрафторэтилены, полидиметилсилоксан (ПДМС), полисилан, триацетат целлюлозы, термопласты в целом и так далее.Также часто используются композиты и сополимеры. Знания о выборе пластмасс или других твердых подложек и обычных клеев широко известны в смежных областях.
«Обычный» — это термин, обозначающий то, что известно в предшествующем уровне техники, к которому относится это изобретение.
«Примерно» и «в целом» — это расширяющие выражения неточности, описывающие состояние «более или менее», «приблизительно» или «почти» в смысле «примерно», где вариация будет незначительной, очевидной. или эквивалентной полезности или функции, а также с указанием существования очевидных незначительных исключений из нормы, правила или предела.Например, в различных вариантах осуществления вышеуказанные термины относятся к количеству в пределах 20%, 10%, 5%, 1% или 0,1% от значения, которое следует за термином.
Если контекст не требует иного, во всем описании и формуле изобретения слово «содержать» и его варианты, такие как «включает» и «содержащий», следует толковать в открытом, включающем смысле, то есть как « в том числе, но не ограничивается».
2. Особенности и способы использования микрофлюидных картриджей и устройств для отделения сывороткиПримерные варианты осуществления изобретения можно лучше понять со ссылкой на прилагаемые фигуры.Однако следует понимать, что проиллюстрированные варианты осуществления не ограничивают объем изобретения, и некоторые неиллюстрированные варианты осуществления также включены.
РИС. 1 представляет собой схематический вид устройства , 110, , иллюстрирующий работу первого варианта осуществления изобретения. Как показано на фиг. 1 микрожидкостное устройство , 110, содержит микрожидкостный канал 120 , имеющий первый конец 122 и второй конец 124 . Как показано, устройство , 110, имеет форму картриджа, однако форма устройства , 110, не является существенной для настоящего изобретения, и специалисты в данной области техники могут легко выбрать подходящую форму для данного применения.Микрожидкостные устройства по настоящему изобретению, такие как устройство , 110, , могут быть сконструированы из материала, такого как пластик, майлар или латекс, с использованием такого способа, как литье под давлением или ламинирование.
Как показано на фиг. 1, устройство 110 содержит вход для образца 130 , соединенный по текучей среде с первым концом 122 микрожидкостного канала 120 для приема жидкого образца, и композитную мембрану 140 , расположенную между входом для образца 130 и первым концом 122 микрофлюидного канала 120 .Используемый здесь термин «мембрана» относится к любому плоскому материалу с Z-размером, включая фильтры, которые являются пористыми мембранами. Композитная мембрана , 140, способна обеспечить матрицу для удержания пробы крови на месте и, что важно, способствовать коагуляции пробы крови. Композитная мембрана 140 также способна избирательно удерживать свернувшиеся компоненты образца крови и другие выбранные частицы, такие как лейкоциты, эритроциты, полимерные шарики, такие как полистирол или латексные шарики размером от 1 до 100 мкм, и клетки бактерий, такие как E.coli , из жидкого образца. Композитная мембрана , 140, может содержать множество фильтров или мембран или один фильтр или мембрану, содержащую множество различных типов волокон. Дополнительный пальцевой насос 150 , имеющий вентиляционное отверстие 152 , соединен по текучей среде со вторым концом 124 микрожидкостного канала 120 .
Во время работы образец жидкой крови помещается во впускное отверстие для образца 130 (как показано на ФИГ.1), после чего жидкая кровь абсорбируется мембраной 140 , которая способствует свертыванию пробы крови. Пальцевый насос , 150, нажимается либо вручную пользователем, либо механически с помощью внешнего устройства, вентиляционное отверстие 152 по существу закрыто, например, путем закрытия вентиляционного отверстия 152 , а затем отпускается пальцевой насос 150 . Во время нажатия пальцевого насоса 150 вентиляционное отверстие 152 остается открытым, так что воздух в пальцевом насосе 150 может быть выпущен через вентиляционное отверстие 152 .После отпускания пальцевого насоса 150 в микрожидкостном канале 120 создается отрицательное давление жидкости, и жидкая проба сыворотки всасывается через мембрану 140 в и через микрофлюидный канал 120 в лунку для сбора пробы 170 . Напротив, свернувшиеся компоненты, а также частицы образца удерживаются композитной мембраной 140 и не попадают в лунку для сбора образца 170 . В различных вариантах реализации отрицательное давление создается не с помощью пальцевого насоса (например,g., соответствующий пневматический инструмент или другие средства), или жидкость движется под действием силы тяжести.
РИС. 2A-B показаны виды в поперечном разрезе альтернативных вариантов реализации композитной мембраны , 140, . Как показано на фиг. 2А, композитная мембрана может содержать две мембраны, мембраны , 142, и , 144, . Мембраны , 142, и , 144, могут содержать одинаковые или разные материалы. В одном варианте осуществления мембрана , 142, содержит материал, активирующий свертывание крови, например стеклянные волокна.В одном варианте осуществления вторая мембрана , 144, может быть выбрана для обеспечения функций отделения частиц. В этом варианте осуществления мембрана , 144, может содержать фильтр с размером пор около 1-2 мкм для избирательного удаления эритроцитов и лейкоцитов из жидкого образца. Такие мембраны могут включать, но не ограничиваются ими, асимметричные и неасимметричные мембраны, содержащие полисульфон (производимые PALL, Inc.). Две или более мембраны могут быть наложены друг на друга в устройстве , 110, .
Во время работы проба крови помещается во впускное отверстие для пробы 130 . Когда капля цельной крови наносится на устройство , 110, , образец крови втягивается в мембрану , 142, , что вызывает свертывание крови. Под отрицательным давлением свернувшийся образец далее втягивается во вторую мембрану 144 , которая удерживает сгустки и твердые частицы, в то время как жидкий образец сыворотки проходит через мембрану в пустоты 182 и 184 .Объем пустот 182 и 184 достаточно мал, так что отделенный образец сыворотки перемещается капиллярным потоком в первый конец 122 микрожидкостного канала.
Альтернативный вариант составного фильтра показан на фиг. 2Б. Как показано, составной фильтр , 146, содержит единую мембрану, содержащую множество волокон разных типов, по меньшей мере одно из которых способствует свертыванию несектированной крови. Волокна, выбранные для композитной фильтрующей среды, включают, помимо прочего, хлопковые волокна, микроволокна из стекловолокна, штапельные волокна из полиэфира (ПЭТ) и связующие волокна из полиэфира с низкой температурой плавления.Полиэфирные штапельные волокна плотностью около 1,5 денье (где «денье» — это терминология, относящаяся к единице, которая описывает толщину и длину волокна) и длиной около 0,25 дюйма могут быть основой фильтра для обеспечения общей структуры. мембраны. Необязательно, волокна хлопкового линта могут быть использованы для создания легко смачиваемой капиллярной сети для пассивного протягивания крови через фильтр. Стеклянные микроволокна со средним диаметром волокна около 0,40 мкм могут создавать мелкопористую структуру, необходимую для разделения ячеек и частиц.Волокна могут быть соединены ткаными или неткаными средствами. Фильтры из нетканого материала могут быть изготовлены способом мокрого, фильерного способа производства или выдувания из расплава. Для увеличения прочности к композитной мембране необязательно могут быть добавлены полиэфирные связующие волокна.
В качестве альтернативного варианта осуществления настоящего изобретения композитные мембраны на фиг. 2A-B может дополнительно содержать один или несколько ускорителей свертывания крови. Активаторы свертывания крови, известные в данной области, включают, помимо прочего, тромбин, змеиные яды, такие как яд гадюки Рассела, фактор активации тромбоцитов (PAF или ß-ацетил-yO-алкил-L-∂-фосфатидилхолин), коллаген, материалы. несущие множественные отрицательные заряды на своей поверхности, такие как боросиликатные хлопья или полые шарики, и алюмосиликатные минеральные глины, такие как каолин.
РИС. 3 представляет собой схематический вид устройства , 110, , иллюстрирующий работу одного варианта осуществления изобретения. Лунка для сбора проб 170 может быть закрыта липкой мембраной 190 . Во время работы устройство 110 снабжается колодцем для сбора проб 170 , изолированным от окружающей среды липкой мембраной 190 . В одном варианте осуществления настоящего изобретения клейкая мембрана , 190, представляет собой съемную ленту, чувствительную к давлению.Образец жидкой крови помещается во впускное отверстие для образца , 130, , после чего жидкая кровь поглощается фильтром , 140, , который способствует коагуляции образца крови. Пальцевый насос , 150, нажимается либо вручную пользователем, либо механически с помощью внешнего устройства, вентиляционное отверстие 152 по существу закрывается, например, путем закрытия вентиляционного отверстия 152 , а затем отпускается пальцевой насос 150 . Во время нажатия пальцевого насоса 150 вентиляционное отверстие 152 остается открытым, так что воздух в пальцевом насосе 150 может быть выпущен через вентиляционное отверстие 152 .После отпускания пальцевого насоса 150 в микрожидкостном канале 120 создается отрицательное давление жидкости, и жидкая проба сыворотки всасывается через мембрану 140 в и через микрофлюидный канал 120 в лунку для сбора пробы 170 . Клейкая мембрана , 190, снимается с устройства , 110, посредством манипуляции пользователем с язычком 195 , чтобы можно было удалить отделенный образец сыворотки для дальнейшего анализа. Как отмечалось выше, пальцевой насос не является обязательной характеристикой всех вариантов осуществления, и движение жидкости можно инициировать и / или поддерживать другими средствами.
Также предлагаются методы отделения сыворотки от образцов цельной крови с использованием микрофлюидных устройств. Например, в некоторых вариантах осуществления такие способы включают введение образца крови во входное отверстие для образца любого из описанных микрофлюидных устройств и приведение образца крови в контакт с композитной мембраной в нем. Затем выделенная сыворотка может быть выделена пользователем и использована в дальнейших анализах, например, анализах перекрестного сопоставления путем контактирования выделенной сыворотки с образцом крови (например,g., образец крови реципиента) и наблюдение за наличием или отсутствием реакции агглютинации.
3. Характеристики и способы использования микрофлюидных картриджей и устройств для перекрестного анализа кровиВарианты микрожидкостных устройств по настоящему изобретению представляют собой плоские одноразовые картриджи, которые обычно имеют размер кредитной карты. Большинство элементов конструкции и управления жидкостью на картридже имеют внутренние размеры в диапазоне от менее 100 мкм до нескольких мм и предназначены для работы с объемами жидкости от нескольких микролитров до одного или двух миллилитров.
РИС. 4 представляет собой схематический вид микрофлюидного устройства , 100, , иллюстрирующий работу другого варианта осуществления изобретения. Как показано, устройство , 100, имеет форму картриджа, однако форма устройства 100 не является существенной для настоящего изобретения, и специалисты в данной области техники могут легко выбрать подходящую форму для данного применения. Микрожидкостные устройства по настоящему изобретению, такие как устройство , 100, , могут быть изготовлены из материала, такого как прозрачный пластик, майлар или латекс, с использованием такого способа, как литье под давлением или ламинирование.
Как показано на фиг. 4 микрожидкостное устройство 100 содержит подсхему жидкости 110 для отделения сыворотки. Подсхема , 110, содержит микрожидкостный канал , 120, , имеющий первый конец 122 и второй конец 124 . Подсхема текучей среды 110 дополнительно содержит вход для образца 130 , соединенный по текучей среде с первым концом 122 микрожидкостного канала 120 для приема жидкого образца и композитную мембрану 140 , расположенную между входом для образца 130 и первым концом 122 микрофлюидного канала 120 .Используемый здесь термин «мембрана» относится к любому плоскому материалу с Z-размером, включая фильтры, которые являются пористыми мембранами. Композитная мембрана , 140, способна обеспечить матрицу для удержания пробы крови на месте и, что важно, способствовать коагуляции пробы крови. Композитная мембрана 140 также способна избирательно удерживать свернувшиеся компоненты образца крови и другие выбранные частицы, такие как лейкоциты, эритроциты, полимерные шарики, такие как полистирол или латексные шарики размером от 1 до 100 мкм, и клетки бактерий, такие как E.coli , из жидкого образца. Композитная мембрана , 140, может состоять из множества фильтров или мембран или одного фильтра или мембраны, состоящих из множества различных типов волокон. Пальцевой насос 150 , имеющий вентиляционное отверстие 152 , гидравлически соединен со вторым концом 124 микрожидкостного канала 120 . Хотя пальцевой насос проиллюстрирован, он не является обязательной характеристикой всех вариантов осуществления, и движение жидкости может быть инициировано и / или поддержано другими средствами.
Во время работы образец жидкой крови помещается во впускное отверстие для образца 130 (как показано на фиг. 4), после чего жидкая кровь абсорбируется мембраной 140 , что способствует коагуляции образца крови. Пальцевый насос , 150, нажимается либо вручную пользователем, либо механически с помощью внешнего устройства, вентиляционное отверстие 152 по существу закрыто, например, путем закрытия вентиляционного отверстия 152 , а затем отпускается пальцевой насос 150 .Во время нажатия пальцевого насоса 150 вентиляционное отверстие 152 остается открытым, так что воздух в пальцевом насосе 150 может быть выпущен через вентиляционное отверстие 152 . При отпускании пальцевого насоса 150 в микрожидкостном канале 120 создается отрицательное давление воздуха, и жидкий образец сыворотки всасывается через мембрану 140 в и через микрожидкостный канал 120 в лунку для сбора образца 170 . Напротив, свернувшиеся компоненты образца удерживаются композитной мембраной 140 и не попадают в лунку для сбора образца 170 .Разделенная сыворотка должна быть вручную удалена пользователем для дальнейшего перекрестного анализа, как описано ниже.
Картридж элемента корпуса 100 дополнительно содержит подсхему смешивания для смешивания растворенных веществ между двумя или более жидкими образцами. Как показано на примере микрофлюидного устройства на фиг. 4, три впускных канала 212 , 214 и 216 , как правило, с впускными скважинами 222 , 224 и 226 , соединены в промежуточный узел 230 .Жидкая проба вводится в первую впускную лунку, а другая проба или жидкий реагент вводится во вторую впускную лунку. Необязательно, третий жидкий образец вводят в третью лунку. Один образец или реагент будет включать суспензию эритроцитов в виде частиц. Второй образец или реагент будет включать отделенную сыворотку. Третий, необязательный образец или реагент может включать разбавитель, как более подробно описано ниже.
Микрожидкостное устройство включает микропассивные клапаны, расположенные между впускными каналами 212 , 214 и 216 и ступенчатым соединением 230 , и сконфигурированы для образования двойного гидравлического затвора.Упоры для жидкости иллюстрируют общий принцип, согласно которому водная жидкость не будет преодолевать барьер поверхностной энергии без дополнительной силы. Таким образом, образуется мениск там, где геометрия канала резко расширяется или образуется поверхность гидрофобного барьера. При подаче энергии, например, в виде импульса всасывания, приложенного ниже по потоку пальцевым насосом 260 или другим средством для запуска анализа, все жидкости будут одновременно проходить через микропассивные клапаны и попадать в общий змеевиковый канал смешения 240 .Жидкости текут в змеевиковый канал смешения 240 за счет капиллярного действия, и растворенные вещества в жидкостях смешиваются вместе за счет диффузии, когда жидкости проходят через змеевидный канал смешения. Извилистые витки смесительного канала увеличивают общую длину смесительного канала и, следовательно, расстояние, пройденное жидкостями. Важно отметить, что увеличение времени нахождения жидкостей в канале смешения за счет змеевидной конфигурации также увеличивает время смешивания растворенных веществ в потоках жидкости за счет диффузии.Когда суспензия эритроцитов в виде частиц контактирует с сывороткой во втором образце, антитела, присутствующие во втором образце, вызывают реакцию агглютинации, если нет перекрестного соответствия между двумя образцами, демонстрируя, что они несовместимы для переливания крови. . Напротив, реакции агглютинации не происходит, если первый и второй образцы подходят для переливания крови. Реакции агглютинации наблюдаются пользователем по появлению динамически движущихся агрегатов или «сгустков» частиц в змеевиковом смесителе 240 и в нижнем канале 250 микрофлюидного устройства.Длина змеевидного канала выбирается так, чтобы время, в течение которого текущие жидкости находились в змеевидном канале, было достаточно для смешивания жидкостей и возникновения реакции агглютинации, если нет перекрестного совпадения. Длина, которая обеспечивает достаточное перемешивание для проведения реакции агглютинации, называется «критической длиной».
Нижние поверхности входных колодцев 222 , 224 , 226 , входные каналы 212 , 214 , 216 , змеевиковый смеситель 240 и выхлопная труба 250 могут быть покрыты поверхностно-активное вещество, делающее поверхности гидрофильными и способствующее капиллярному течению жидкого образца через микрофлюидный контур.Пользователь может наблюдать за реакциями агглютинации посредством визуального обнаружения агрегатов или «сгустков» движущихся частиц, динамически проходящих через змеевиковый смеситель , 240, и в нисходящий канал 250 . Нисходящий канал конфигурируется так, что он имеет большую ширину, чем ширина канала смешения. Из-за большей ширины выходного канала, который увеличивает объем поперечного сечения канала, тем самым снижает скорость фронта жидкости, однако скорость потока жидких потоков в смесительном канале остается прежней, тем самым увеличивая количество пробы. для микширования в канале.
В альтернативном варианте микрожидкостных устройств по настоящему изобретению элемент корпуса картриджа 100 имеет два впускных канала 212 и 216 , обычно с впускными колодцами 222 и 226 , соединенных ступенчатым соединением 230 . Жидкий образец, содержащий суспензию эритроцитов в виде частиц, вводится в канал 212 ; второй жидкий образец, содержащий отделенную сыворотку, вводят в канал 216 .В этом варианте осуществления изобретения разбавление пробы крови в виде частиц может быть выполнено вне картриджа перед загрузкой пробы крови во впускную лунку 222 микрофлюидного устройства по фиг. 4. Разбавитель эритроцитов может быть включен для достижения любого из следующих преимуществ: снижение концентрации агглютининов в донорской крови, которые могут участвовать в аутоиммунной реакции с донорскими эритроцитами и вызывать гемолиз или агглютинацию в качестве побочная реакция; снижение дзета-потенциала (отрицательного поверхностного заряда) на эритроцитах донора, что препятствует агрегации клеток; уменьшение плотности эритроцитов в окне обнаружения, так что агрегаты клеток легче рассматривать; или предотвращение опосредованного комплементом стерического препятствия связыванию антитело-антиген, которое может способствовать ложноотрицательной реакции (например,г., кросс-матч). Примеры разбавителей включают, но не ограничиваются ими, изотонические солевые растворы, которые могут включать или не включать ЭДТА для предотвращения свертывания донорской крови перед анализом перекрестного соответствия. Когда образец крови в виде твердых частиц и разбавитель контактируют с сывороткой во втором образце, антитела, присутствующие во втором образце, вызывают реакцию агглютинации, если нет перекрестного совпадения между образцами эритроцитов и сыворотки, что указывает на то, что они не совместим для переливания крови.Напротив, реакция агглютинации не будет происходить, если образцы твердых частиц и сыворотки совместимы для переливания крови. Пользователь наблюдает за реакциями агглютинации по появлению динамически движущихся агрегатов или «комков» частиц в змеевиковом смесителе 240 и в нижнем канале 250 .
Другой альтернативный вариант микрожидкостных устройств по настоящему изобретению показан на фиг. 5. В этом варианте осуществления микрожидкостное устройство 105 содержит подсхему жидкости 115 для отделения сыворотки, которая по текучей среде соединена с впускным каналом 216 .Отделение сыворотки выполняется, как описано выше; однако в этом варианте осуществления изобретения камера для сбора сыворотки 175 функционирует как впускное отверстие для образца 226 варианта осуществления, показанного на фиг. 4. Принципы работы микрофлюидного устройства 105 этого варианта осуществления изобретения аналогичны принципам работы микрофлюидного устройства 100 , за исключением того, что работа микрофлюидного устройства 105 не требует, чтобы пользователь вручную наносил образец сыворотки на впускной колодец для образца.
Также предусмотрены способы использования любого из вышеупомянутых микрофлюидных устройств для перекрестного сопоставления двух разных образцов крови, например перекрестного сопоставления образца крови донора и образца крови реципиента. Например, способы могут быть для выполнения перекрестного сопоставления образца крови донора и образца крови реципиента. В одном из этих вариантов осуществления способ включает:
a) контактирование образца донорской крови с композитной мембраной любого из вышеупомянутых микрофлюидных устройств;
б) выделение сыворотки из образца донорской крови;
c) контактирование изолированной сыворотки с образцом крови реципиента; и
d) наблюдение наличия или отсутствия реакции агглютинации.
Преимущественно определенные варианты осуществления способов выполняются с использованием микрожидкостных устройств, в которых подсистема текучей среды для отделения сыворотки соединена по текучей среде с впускным отверстием для образца и каналом смешивания (например, как описано со ссылкой на фиг. 5). В вариантах осуществления этих способов выполняется разделение сыворотки, и отделенная сыворотка контактирует с образцом цельной крови на том же микрофлюидном устройстве. Например, в некоторых вариантах реализации способы перекрестного сопоставления включают:
a) введение образца донорской крови в подсхему отделения сыворотки микрофлюидного устройства, имеющего соединенные по текучей среде подсхемы разделения сыворотки и подсхемы смешивания растворенных веществ (например,g., как описано выше со ссылкой на фиг. 5) и контактирование пробы донорской крови с композитной мембраной в подсхеме отделения сыворотки для отделения донорской сыворотки от пробы донорской крови;
b) контактирование донорской сыворотки с образцом крови реципиента в канале смешивания подсхемы смешивания растворенных веществ; и
c) наблюдение наличия или отсутствия реакции агглютинации.
ПРИМЕРЫ Пример 1: Оценка стекловолоконных фильтров для улучшения свертывания кровиЭтот пример демонстрирует, что стекловолоконные фильтры способствуют свертыванию крови на микрофлюидном устройстве.
Различные фильтры из боросиликатного стекловолокна, представленные в Таблице 1, были уложены вместе с мембраной Pall Vivid GR и ламинированы в «картриджи» (т.е. в микрожидкостное устройство) с использованием стандартных способов изготовления, известных в данной области техники. Для тестирования на фильтр наносили 100 мкл свежей цельной крови и давали возможность свернуться в течение 15 минут. Жидкий образец вытягивался вакуумом в сборную камеру. Эффективность фильтров оценивали по объему сыворотки, полученной за одну минуту, и по цвету сыворотки.Как показано в Таблице I, некоторые из протестированных стекловолоконных фильтров обеспечивали отделение сыворотки на карте. Розовая сыворотка указывает на то, что произошел некоторый гемолиз. Эти результаты показывают, что отделение сыворотки неожиданно может быть достигнуто на карте (т.е. в микрофлюидном устройстве) путем включения стекловолоконного фильтра в конструкцию устройства. Интересно, что не все фильтры из стекловолокна показали одинаковые свойства в этой оценке. Стекловолоконный фильтр Porex по своим функциям превосходил другие в том, что он не способствовал гемолизу, а, скорее, генерировал чистый образец сыворотки.Размер пор или толщина фильтров испытанных стекловолоконных фильтров варьировались, но корреляции с характеристиками не наблюдалось.
Таким образом, эта уникальная конструкция композитного фильтра, в которой используется фильтр из боросиликатного стекловолокна, демонстрирует превосходные функциональные возможности по сравнению с фильтрующими устройствами предшествующего уровня техники. В то время как фильтры для крови предшествующего уровня техники ограничиваются выполнением отделения частиц, композитные фильтры настоящего изобретения могут дополнительно способствовать свертыванию крови, тем самым удаляя ингибирующие факторы свертывания и обеспечивая сыворотку для дальнейшего диагностического анализа.
Этот пример демонстрирует отделение сыворотки с помощью микрофлюидного устройства, включающего композитный фильтр из стекловолокна.
Микрожидкостная подсхема с камерой для сбора и портом была разработана для отделения сыворотки от образца цельной крови. Свежую цельную кровь, собранную из пальца (приблизительно 200 мкл), наносили на композитный фильтр, как описано выше, и давали возможность свернуться. Во время работы указательный палец пользователя сжимает пальцевой насос, а второй палец закрывает вентиляционные отверстия. Вакуум, создаваемый при удалении указательного пальца, вытягивает образец через фильтры в камеру для сбора.Отфильтрованный образец собирали с помощью механического дозатора с одноразовым наконечником. Восстановленный материал характеризовали как сыворотку путем измерения остаточного содержания фибриногена. Плазма содержит фибриноген, в то время как сыворотка обеднена этим белком из-за активации каскада свертывания, во время которого фибриноген превращается в нерастворимый фибрин с образованием сгустка крови. Сгусток крови задерживается в композитном фильтре, а жидкая сыворотка проходит через фильтр в сборную камеру.
Набор фибриногена для ELISA (производства Alpco Diagnostics, Salem, N.H.) использовали для измерения содержания фибриногена в образцах. Образцы, полученные из подсистемы отделения сыворотки, сравнивали с сывороткой, полученной с помощью обычного протокола свертывания крови и центрифугирования в вакуумных контейнерах. Также анализировали плазму, собранную в вакуумных контейнерах, содержащую цитрат натрия в качестве антикоагулянта. Было обнаружено, что четыре различных образца плазмы содержат от 2,9 до 4,2 мг / мл фибриногена, в то время как образцы сыворотки, полученные центрифугированием, в основном обеднены фибриногеном и содержат от 0 до 300 нг / мл фибриногена (примерно в 10 000 раз меньше, чем в плазме).Неожиданно, как показано на фиг. 6, количество фибриногена, обнаруженное в каждом из одиннадцати образцов материала, полученного из подсхемы отделения сыворотки, также было незначительным (от 0 до 3000 нг / мл фибриногена). Эти результаты демонстрируют успешную конструкцию подсхемы отделения сыворотки в микрофлюидном устройстве за счет использования стекловолоконного композитного фильтра. Микрожидкостные устройства, раскрытые здесь, предлагают значительные преимущества по сравнению с обычными протоколами разделения сыворотки, которые требуют большого, тяжелого и дорогостоящего лабораторного оборудования для практики.
Различные варианты осуществления, описанные выше, могут быть объединены для обеспечения дополнительных вариантов осуществления. Все патенты США, публикации патентных заявок США, заявки на патенты США, иностранные патенты, зарубежные патентные заявки и непатентные публикации, упомянутые в данном описании и / или перечисленные в таблице данных заявки, включая, помимо прочего, номера патентных заявок США. 61/820 576; 61/820,585 и 61/820,579; каждая, поданная 7 мая 2013 г., полностью включена в настоящий документ посредством ссылки.Аспекты вариантов осуществления могут быть изменены, если необходимо использовать концепции различных патентов, заявок и публикаций для предоставления дополнительных вариантов осуществления. Эти и другие изменения могут быть внесены в варианты осуществления в свете вышеприведенного подробного описания. В общем, в следующей формуле изобретения используемые термины не должны толковаться как ограничивающие формулу изобретения конкретными вариантами осуществления, раскрытыми в описании и формуле изобретения, но должны толковаться как включающие все возможные варианты осуществления вместе с полным объемом эквивалентов, к которым такие претензии имеют право.Соответственно, формула изобретения не ограничивается раскрытием.
Восстановление мышц при подтяжке живота меняет восстановление: вот как
Не все подтяжки живота одинаковы. Некоторые из них предполагают более обширную операцию, чем другие, и по этой причине то, чего ожидать во время выздоровления, может варьироваться от человека к человеку. Цель подтяжки живота — сделать талию стройнее и подтянуть, чтобы она выглядела более красивой и молодой, но хирургический метод, который поможет вам добиться этого (и надеть новую симпатичную одежду), может сильно отличаться.
В зависимости от количества удаляемой лишней кожи и жира разрезы могут быть короче или более обширными, включая изменение положения пупка. Но одним из важнейших факторов, влияющих на восстановление после абдоминопластики, также называемой абдоминопластикой , является то, включено ли восстановление мышц.
Почему мышце иногда требуется
ремонтЕсли вы видели пресс хотя бы у одного супергероя, вы знаете, о каких мышцах идет речь.Он называется rectus abdominis и проходит вертикально от грудины до лобковой кости. У него левая и правая стороны, разделенные посередине полосой ткани, называемой linea alba .
Белая линия может быть чрезмерно растянута, как правило, во время беременности, но также из-за сильного увеличения веса или травмы при подъеме тяжестей. Когда это происходит, две стороны мышцы раздвигаются дальше друг от друга, что приводит к выпячиванию живота наружу, которое не исчезает, даже когда вес (детский или какой-то другой) уменьшился.Это состояние называется диастаз прямых мышц живота .
Помимо косметической проблемы для некоторых людей, это состояние может влиять на осанку и силу туловища. Это может вызвать боль в животе, бедрах и спине, а также проблемы с кишечником и мочевым пузырем, которые могут иметь огромное влияние на качество жизни.
Почему мышца иногда не требует
ремонтНе все подтяжки живота включают восстановление мышц, потому что не все животы, которым может помочь подтяжка живота, имеют диастаз прямых мышц живота.Даже при растяжении белой линии иногда она может самостоятельно вернуться к своему нормальному размеру. Кроме того, если женщине сделали кесарево сечение, ремонт, скорее всего, к тому времени уже был завершен.
Как восстанавливается мышца
Диастаз прямых мышц живота может исправить хирург общего профиля, но пластические хирурги обычно делают это в рамках процедуры подтяжки живота. Операция включает складывание растянутой ткани белой линии живота и сшивание двух сторон прямой мышцы живота.Хотя вы не можете увидеть это снаружи тела, это включает в себя ушивание вверх и вниз по всей длине живота.
Почему восстановление мышц влияет на восстановление после подтяжки живота
Разница в восстановлении между подтяжкой живота с восстановлением мышц и без восстановления связана с тем фактом, что мышцы сокращаются. В отличие от кожи и жировой ткани, покрывающих брюшную полость, мышцы под ней (а прямая мышца живота большая) являются основными движущими силами и стабилизаторами всего туловища.Это означает, что они сокращаются практически каждый раз, когда вы двигаете своим телом. Эти мышцы задействуются даже простыми движениями, такими как поднятие рук в вертикальном положении или переворачивание в постели, а также кашель и чихание.
Когда мышца восстанавливается, ей нужно время для отдыха, чтобы она могла зажить. Слишком ранние чрезмерные нагрузки могут поставить под угрозу ваши результаты и, безусловно, будут болезненными.
Как восстановление мышц влияет на восстановление
Когда восстановление мышц включено в операцию по подтяжке живота, от вас потребуется быть более осторожным, и ваше восстановление займет немного больше времени — на три-четыре недели дольше.
Симптомы
После восстановления мышц пациенты часто испытывают более быстрое чувство сытости во время еды и ощущение невозможности сделать такой глубокий вдох, как раньше. Это связано с уменьшением пространства внутри брюшной полости из-за напряжения мышц. У желудка меньше места для расширения, а диафрагма встречает большее сопротивление, когда опускается, чтобы вы могли сделать вдох. Обе эти проблемы, если они возникают, обычно решаются в течение четырех-шести недель.
Абдоминальный бандаж
Вскоре после операции вам дадут бандаж для живота, чтобы поддержать восстановленную мышцу и уменьшить общий отек. Вам дадут инструкции, как надевать его, и посоветуют носить его регулярно. Возможно, вам понадобится помощь в том, чтобы надеть и снять его в первые несколько дней.
Ограничения подъема
После операции ваш врач ограничит вас подъемом веса не более 10-15 фунтов. Вам будет запрещено поднимать что-либо более тяжелое в течение полных шести-восьми недель после операции.Вам также не разрешат выполнять какие-либо упражнения по укреплению кора, такие как приседания, чтобы избежать стресса и потенциально разорвать ремонт.
Осанка
Для всех пациентов после подтяжки живота типично слегка сгорбиться из-за осанки. Это нормально, и важно не принимать вертикальное положение и не прилагать чрезмерных усилий во время заживления разреза. Это становится еще более важным после восстановления мышц. Вам могут даже дать ходунки, чтобы передвигаться в первую неделю после операции.
Вам все равно придется вставать с постели
Даже после восстановления мышц ваш хирург потребует, чтобы вы начали двигаться в течение дня после операции. Сюда входит подъем, чтобы сходить в ванную комнату, и, с некоторыми ограничениями, принятие душа. Это важно для вашего общего состояния здоровья, выздоровления и предотвращения образования тромбов. Многие пациенты предпочитают спать в кресле, чтобы облегчить эти движения. Попросите кого-нибудь дома помочь вам, особенно в первые пару недель.
Хотя восстановление мышц действительно добавляет некоторые проблемы к вашему выздоровлению, долгосрочные преимущества могут намного перевесить их. Исследование, опубликованное прошлой осенью (2019 г.), показало, что у послеродовых женщин, перенесших операцию по восстановлению прямой мышцы живота, значительно улучшились функции туловища, недержание мочи и общее качество жизни.